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时间:2020-03-10
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1、高考生物实验总结——实验与探究※必修一《分子与细胞》实验一用显微镜观察多种多样的细胞1、显微镜的使用:取镜安放→对光→制片→观察→收放。(制片时若为植物细胞一般用蒸馏水,动物细胞用生理盐水)(1)低倍镜使用:(观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明)(3)高倍镜使用:先使用低倍镜确定目标→移动装片,使目标位于视野中央→转动转换器,换用高倍镜→调焦(转动细准焦螺旋)(视野较暗,可调反光镜或光圈,可用凹面镜和较大的光圈)2、显微镜使用注意事项:(1)成像特点:放大两次的倒立的虚像。(2)放大倍数计算:物镜的放大倍数×目镜的放大倍数。放大倍数指
2、的是物体的长或宽,而不是面积。(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反,因此存在同向移动原理,即物象在左边则标本往左边移动。(4)低倍镜下成像特点:物像小、细胞数目多、视野亮。物镜离标本远。高倍镜下成像特点:物像大、细胞数目少、视野暗。物镜离标本近。(5)物镜和目镜的判断方法:物镜有螺纹,目镜无螺纹。(6)放大倍数的判断方法:目镜:镜头长放大倍数小,镜头短放大倍数大。物镜:镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小。物镜与装片之间的距离:距离近放大倍数大,距离远放大倍数小。苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液双缩脲试剂斐林试剂实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
3、实验原理:还原糖砖红色橘黄色脂肪红色蛋白质紫色 淀粉 ﹢碘液→蓝色1、还原糖的检测(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热(50—65℃)2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→砖红色)注意:答题时若没有含还原糖不能说没有颜色,而是没有颜色变化。2、脂肪的检测(1)材料的选取:含脂肪量
4、越高的组织越好,如花生的子叶。(2)步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央↓染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)↓制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)↓镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)3、蛋白质的检测(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液,与斐林试剂乙液的浓度不同)(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩脲试剂B液4滴
5、,摇匀→观察颜色变化(紫色)吡罗红甲基绿实验三观察DNA和RNA在细胞中的分布实验原理:DNA绿色,RNA红色8%盐酸能够改变细胞膜的通透性,(实验中细胞会死亡)加速染色剂进入细胞,同时使染色体的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。分布:真核生物的DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。选材:颜色比较浅的,如绿叶不能用;可用人的口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶的内表皮细胞。实验过程见课本P27观察:先低后高,在换高倍镜前选择染色均匀、色泽浅的区域,移到视野中央,将物像调节清晰。实验结果:细胞核
6、呈绿色,细胞质呈红色.实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,(观察叶绿体)口腔上皮细胞临时装片(观察线粒体)2、原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。不用染色。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。注意:①健那绿是专一性染线粒体的活细胞染液。 ②观察藓类叶为低等植物,单层细胞,不用加工即可观察;菠菜叶稍带些叶肉的下表皮(表皮细胞本身没有含叶绿体) ③临时装片中的叶子不能放干了,要随时保持有水状态。实验五观察植物细胞的质壁分离和复原1、条件:细胞内外溶液浓度差,活细胞
7、,大液泡2、材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡,便于观察),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液(不能过高否则细胞可能过度脱水死亡,无法观察复原现象),清水等。3、步骤:制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片另一侧滴清水,一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)4、结论:细胞外溶液浓度>细胞内溶液浓度,细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度<细胞内溶液浓度,细胞吸水质壁分离复原注意:①在0.3g/mL的蔗糖溶液中细胞出现质壁分离;但在8%N
8、aCl和5%KNO3中先出现质壁分离后出现质壁分离复原现象;盐酸、酒精和醋酸等不可用于该实验。②该实验原理可应用于判断细胞死活;测定细胞液的浓度;比较不同植物细胞的
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