不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量探究.doc

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1、不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量探究【摘要】目的考察全自动细胞处理仪ACP215和传统手工制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量差异。方法将采集40袋400ml全血随机分2组，全自动细胞处理仪ACP215组和传统手工法分离组，对制备成的冰冻解冻去甘油红细胞进行血红蛋白质量、游离血红蛋白、白细胞残留量、甘油残留量的质量检测。结果全自动细胞处理仪ACP215制备血红蛋白含量显著高于传统手工制备法，甘油残留量和游离血红蛋白显著低于传统手工制备法，差异具有统计学意义(P0.05)o结论全自动细胞处理仪ACP215制备的

2、冰冻解冻去甘油红细胞质量比传统手工制备冰冻解冻去甘油红细胞质量更好。【关键词】冰冻解冻去甘油红细胞；质量差异；全自动细胞处理仪ACP215冰冻解冻去甘油红细胞主要适用于Rh(-)稀有血型红细胞的长期保存，供临床稀有血型患者应急使用以及自身输血提供方便［1］。加入甘油后红细胞处于高渗状态，必须用梯度洗涤方法去除甘油，目前临床应用的冰冻解冻去甘油红细胞主要是机器和手工两种制备方法，随着科技高速发展，机洗冰冻红细胞，因其操作时间短，洗涤后的Rh（-）红细胞安全性及有效性均良好，逐渐取代手工制备，现将机洗ACP215制

3、备冰冻解冻去甘油红细胞和传统手工制备冰冻解冻去甘油红细胞进行质量比较，现报告如下。1材料与方法1.1材料复方甘油试剂（北京博德桑特）、三珠袋（北京博德桑特）、ACP215红细胞洗涤耗材（美国血技）、9%氯化钠（北京博德桑特）、0.9%氯化钠（山东威高）、输血器（江西洪达）、离心机（贺利氏60001）、振荡器（金坛市）、-80°C冰箱（三洋）、无菌接驳机（泰尔茂）、恒温水浴箱（余姚市东方电工仪器厂）鹄酸钠（天津化学试剂四厂）、氢氧化钠（天津博迪化工）、乙二醇（天津富宇精细化工）、无水乙醇（沈阳华东试剂厂）、稀释液

4、（希森美康医用电子有限公司）、酚駄（沈阳华东试剂厂）、高碘酸钠（天津福晨化学试剂厂）、血浆游离血红蛋白试剂盒（北京瑞尔达生物科技）、溶血剂（希森美康医用电子有限公司）、山东威高滤白血袋。1.2取样采集40袋400ml,分A、B两组。1.3方法1.3.1甘油化方法将去白细胞悬浮红细胞或全血离心去上清，将红细胞移至三珠袋中加甘油，在振荡器上操作，动作需轻柔。200ml红细胞加甘油160ml,控制加甘油速度先慢后快，前8min40滴/min左右，逐渐提高滴速80滴/min左右，25min左右加完。在室温静止30min

5、送-8（rc速冻保存。1.3.2洗脱甘油（手工）：用梯度洗涤方法，先用9%NaCl溶液每200ml全血一袋80ml浓盐，先40滴/min左右，2min后80滴/min,7~8min加完，静止5min,再加入50ml左右的0.9%NaCl,速度控制在60滴/min,静止5min后离心，离心转速2300转，离心时间为6min。离心后去除上清，再加0.9%NaCl80〜100滴/min,加150ml左右离心，离心转速2300转，离心时间为6min,反复三次，最后成品冰冻解冻去甘油红细胞毛重为240ml/Uo1.3.3

6、ACP215制备：-8CTC取出冰冻红细胞，放入37〜421水浴箱内融化，4〜5min/袋，融化后静止5min,利用无菌接驳机将血袋和ACP215全自动细胞处理仪的专用耗材连接，所使用洗涤耗材同手工制备。按照预先编制的程序，自动洗涤冰冻解冻去甘油红细胞。1.4统计学方法数据采用t检验（P