工业微生物实验技术 教学课件 作者 陈剑虹 主编第六章 微生物控制技术.ppt

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1、微生物实验技术第六章微生物控制技术微生物控制技术实验6-1温度对微生物的影响实验6-2紫外线对微生物的影响实验6-3渗透压对微生物的影响实验6-4氢离子浓度对微生物生长的影响实验6-5化学药剂对微生物的影响实验6-1温度对微生物的影响一、实验目的1.了解温度对不同类型微生物生长的影响;2.学习测定微生物最适生长温度的方法。二、实验原理温度能影响微生物的生长、繁殖和新陈代谢,每种微生物都有它的生长温度范围,每种微生物只能在一定的温度范围内生长,低温微生物最高生长温度不超过20℃,中温微生物的最高生长温度低于45℃,而高温微生物能在45℃以上的温度条件下正常生长。实验6-1温度对微生物的影

2、响三、实验材料1.菌种培养24小时的枯草杆菌和大肠杆菌,培养了72小时的黑曲霉或青霉。2.培养基牛肉膏蛋白胨琼脂斜面,马铃薯葡萄糖培养基斜面。3.器材酒精灯,接种针,冰箱,恒温箱。四、实验方法1.接菌 按无菌操作方法进行(1)在5支牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上都接种上枯草杆菌,接种时划直线或曲线。实验6-1温度对微生物的影响(2)在另5支牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上都接种上大肠杆菌,接种时划直线或曲线。(3)在5支马铃薯葡萄糖培养基斜面上接种曲霉或青霉,接种时用点接法。2.培养与观察(1)培养 将上述接种好的菌种,分别放入0℃、15℃、30℃、37℃、50℃五种温度下培养。(2)观察48小时后观

3、察,记录实验结果。五、实验报告记载实验结果,填入表6-1。实验6-1温度对微生物的影响表6-1不同类型微生物在不同温度条件下培养的生长情况菌种0℃15℃30℃37℃50℃枯草杆菌大肠杆菌黑曲霉/青霉注:用“—”表示不生长,“+”表示生长一般,“++”表示生长良好。返回实验6-2紫外线对微生物的影响一、实验目的1.了解紫外线的杀菌作用原理;2.学习紫外线杀菌试验方法。二、实验原理紫外线对微生物有强烈的致死作用,波长260nm的紫外线杀菌力最强。其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。微生物对紫外线的吸收与剂量有关,剂量高低取决于紫外灯的功率、照射距离与照射时间。在本试验中

4、采用15W紫外灯在距灯30cm处通过改变照射时间来处理微生物。紫外线虽有较强的杀菌力,但其穿透力很弱,普通玻璃、薄纸、水层等均能阻止其透过。实验6-2紫外线对微生物的影响三、实验材料1.菌种培养24~48h的金黄色葡萄球菌,黏质沙雷氏菌。2.培养基牛肉膏蛋白胨培养基。3.器材无菌水,无菌平皿,1mL无菌吸管,玻璃刮铲、灭菌五角星形图案纸(牛皮纸或黑纸),紫外灯箱。四、实验方法1.制平板取无菌平皿6套,将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中,使其冷凝成平板。实验6-2紫外线对微生物的影响2.菌悬液制备取试管无菌水2支,以无菌操作法分别取金黄色葡萄球菌和黏

5、质沙雷氏菌各2环,接入无菌水中充分摇匀,制成菌悬液。3.接种将已倒入培养基的平皿分为2组,每组3个,一组接金黄色葡萄球菌,一组接沙雷氏菌,用无菌吸管吸取已制好的菌悬液各0.1mL,分别接种于二组平板上,用无菌玻璃刮铲均匀涂布,随即用无菌镊子夹取无菌图案纸一张,小心放在接种好的平皿中央(图6-1)。实验6-2紫外线对微生物的影响图6-1检查紫外线对微生物生长的影响试验方法1.图案纸2.细菌生长圈3.无菌生长区实验6-2紫外线对微生物的影响4.分组将接种的六个平皿分为三组,每组一个金黄色葡萄球菌,一个黏质沙雷氏菌。5.紫外线处理将紫外灯先开灯预热2~3min。再将上述平皿置于紫外灯下,打开

6、皿盖,在30cm距离处照射。一组照1min,1组照5min,l组照l0min,小心地取下图案纸,盖上皿盖。用黑布或厚纸遮盖,送入培养室内。6.培养将平皿于28~30℃温度下培养48h。五、实验报告取出平皿观察分析平板上细菌生长的状况,并绘图表示。返回实验6-3渗透压对微生物的影响一、实验目的了解渗透压对微生物生长的影响。二、实验原理在等渗溶液中,微生物正常生长繁殖;在高渗溶液中,细胞失水收缩,而水分为微生物生理生化反应所必需,失水会抑制其生长繁殖;在低渗溶液中,细胞吸水膨胀,大多数微生物具有较为坚韧的细胞壁,而且个体较小,因而在低渗溶液中一般不会像无细胞壁的细胞那样容易发生裂解,具有细

7、胞壁的微生物受低渗透压的影响不大。实验6-3渗透压对微生物的影响三、实验材料1.菌种金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,盐沼盐杆菌。2.培养基分别含0.85%、5%、10%、15%及25%NaCl的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。3.仪器或无菌平皿,接种环等。四、实验方法1.将含不同浓度NaCl的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化、倒平板。2.在已凝固的平板皿底用记号笔划成三部分,分别标记上述三种菌名。实验6-3渗透压对微生物的影响3.将上述平板置于28℃温室中,4d后

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