生物技术重点.doc

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1、生物技术重点1.生物技术在中药的应用：（论述）%1.生物技术在高质量中药原料的研究和生产以及中药材资源的可持续利用屮有巨大的应用潜力：1•屮药基因研究室屮药资源保护、种植和可持续利用的重要手段，如建立珍惜濒危中药材的基因库2.细胞工程技术为中药和天然药物人工资源的开发提供了有效途径：如克隆技术3.发酵工程技术为现代中药的生产提供了中药手段蛋白质工程和酶工程为中药和天然药物活性成分生产提供了最佳技术手段之…，如人参皂昔的转化%1.生物技术为提高中药和天然药物品质评价水平提供了新的实验方法，如基因鉴别技术为中药材品种鉴定提供了新手段%1.生物技术为中药和天然药物新

2、药研究与开发提供了新的工具和途径，如生物芯片2基因工程（概念）：指在体外将核酸分子插入病毒，构成遗传物质的新组合，并使Z参如到原先这类分子的宿主细胞内，能持续稳定地繁殖和表达外源DNA。（简答）3RFLP技术邙艮制性内切酶切片段长度多态性）：由于不同物种基因组内限制性酶切位点的不同造成酶切后DNA片段长度发生变化，限制性片段的长度在不同个体间呈多态性现象，即称为限制性片段长度多态性。RFLP基本步骤：靶DNA的制备一>核酸探针的标记一>杂交显示（简答）4液体深层发酵培养一般流程关于液体深层培养:用液体深层发酵罐从罐底部通气，送入的空气由搅拌桨叶分散

3、成微小气泡以促进氧的溶解。这种由罐底部通气搅拌的培养方法，相对于由气液界面靠自然扩散使氧溶解的表血培养法来讲，称为深层培养法。特点是容易按照生产菌种对于代谢的营养要求以及不同生理时期的通气、搅拌、温度、与培养基屮氢离子浓度等条件，选择最佳培养条件。深层培养基本操作的3个控制点灭菌：发酵工业要求纯培养，因此在发酵开始前必须对培养基进行加热灭菌。所以发酵罐具有蒸汽夹套，以便将培养基和发酵罐进行加热灭菌,或者将培养基由连续加热灭菌器灭菌，并连续地输送于发酵罐内。②温度控制：培养基灭菌后，冷却至培养温度进行发酵，由于随着微生物的增殖和发酵会发热、搅拌产热等，所以为维持

4、温度恒定，须在夹套中以冷却水循环流过。③通气、搅拌：空气进入发酵罐前先经空气过滤器除去杂菌,制成无菌空气，而后由罐底部进人，再通过搅拌将空气分散成微小气泡。5影响植物次级代谢产物累积的因素（简答）一、外植体的选择不同外植体的悬浮细胞培养物，基最大次级代谢产物的累积时间各不相同。延迟期、加速期、稳定期、与细胞生长同步植物次生产物种类繁多（据保守估计已超过2万种）植物次生代谢产物在医药、食品、轻化工等领域有重耍意义二、培养条件（一）培养环境的内在因素1.接种和诱导；2.基本培养基元素组成（氮、磷、铜等）；3•碳源4.植物生长调节剂：起关键性作用5.氧气和pH6.渗

5、出物（二）两步培养法即第一步使用适合细胞生长的培养基，称为“生长培养基”，第二步使用适于次级代谢产物合成的培养基，称为“生产培养基”。生长培养基的特点：实现细胞的高生产率生产培养基的特点：通常具有较低含量的硝酸盐和磷酸盐，并含冇较低的糖分或较少的碳源（三）诱导子（了解内容）植物抗毒素：植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物。诱导子：触发形成抗毒素信号的物质。生物诱导子：植物体在防御过程中为对抗微生物感染而产生的物质，主耍包括分生抱子、降解细胞壁的酶类、细胞壁碎片、有机体产生的代谢物等成分。非生物诱导子：不是植物细胞中天然成分但乂能触发植物细胞形成抗毒

6、素信号的物质。（四）培养环境的外部因素（1）温度：20-28度。（2）搅拌频率。（3）培养容器的影响。（4）光的影响6两步培养法即第一步使用适合细胞生长的培养基，称为“生长培养基”，第二步使用适于次级代谢产物合成的培养基，称为“生产培养基”。7植物细胞、组织转化的概念及优缺点。答：概念：利用职务培养细胞为酶源使某种前体化合物转化为相应产物的技术称为植物细胞转化。优缺点：一、优点（1）植物细胞与微生物虽然同样能催化氧化、还原等一系列的反应，但分属不同的自然分类系统，所含的酶系显然不同，代谢途径有明显的差异。而大多数天然活性成分來自植物，通过饲喂前体物质，可用作研

7、究生物合成途径的模型。这通过微生物转化途径是很难达到的。（2）许多天然活性成分在自然界中含量很低，如红豆杉中含有的有效成分紫杉醇是抗癌和治疗白血病的冇效成分，但原植物的含量只有十万分之一。用植物细胞、组织进行转化有望实现紫杉醇最重的工业化二、缺点：植物细胞系不稳定、产率低、生长速度慢、放大不成功,生产成本较高，使植物细胞、组织进行转化的工业化更困难。