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1、第7卷第12期环境污染治理技术与设备Vol.7,No.122006年12月TechniquesandEquipmentforEnvironmentalPollutionControlDec.2006酸性多糖微生物絮凝剂的提取、纯化与分析12133陈盛钱伟罗志敏佘晨兴马秀玲(11福建师范大学福清分校,福清350300;21福建师范大学地理科学学院,福州350007;31福建师范大学化学与材料学院,福州350007)摘要对一株链球菌发酵获得的絮凝活性物质进行了分离和提取,并应用DEAE2SephadexA25,Sephdarose4B凝胶色谱柱从发酵液中提取
2、活性物质并纯化。通过薄层色谱、气相色谱、紫外光谱、红外光谱、元素分析等表征,初步推测了其主要成5分为酸性多糖,其中多糖含量(73%)、糖醛酸含量(2016%)、多糖分子量为413×10,可能还有少量氨基或短肽结构。关键词微生物絮凝剂纯化分析中图分类号X172文献标识码A文章编号100829241(2006)1220061204Extraction,purificationandanalysisofanacidpolysaccharidebioflocculant12133ChenShengQianWeiLuoZhiminSheChenxingMaXiul
3、ing(11FuqingCollegeofFujianNormalUniversity,Fuqing350300;21CollegeofGeographyScience,FujianNormalUniversity,Fuzhou350007;31CollegeofChemistryandMaterials,FujianNormalUniversity,Fuzhou350007)AbstractBioflocculant,precipitatedbyethanolandSevag,waspurifiedtohomogeneitywithSephadex2D
4、EAEandSepharose4Bgelchromatogramcolumns.Theresultsuggeststhattheeffectivecomponentinbiofloc2culantwaspolysaccharidecharacterizedbyTLC、GC、UVandIR.Thebiopolymercontainedsugar(73%)anduronicacid(2016%).Elementalanalysisresultsindicatedthatlittleamdioandpeptidemightexist.Themolec25.63
5、ularweightmeasuredbyHPLCwas1.0×10.Keywordsbioflocculant;purification;analysis自20世纪70年代在研究酞酸酯降解过程中,分别对发酵液进行处理,静置过夜,采用文献[6]的分离得到了有絮凝活性的微生物培养液,此后微生方法测定发酵液絮凝活性的变化,初步分析絮凝活物絮凝剂作为一种新型的絮凝剂种类,因其价廉、高性物质的成分。效、无毒、无二次污染、絮凝对象广泛等优点逐步受500mL发酵液离心,上清液减压浓缩至50mL,到人们的重视。目前报道能产生絮凝剂的微生物包加入150mL预冷的无水乙醇静
6、置过夜后,在2000括霉菌、细菌、放线菌和酵母菌。由于不同微生物产r/min条件下离心10min。用少量乙醇洗涤沉淀后生的絮凝剂其组成及结构各不相同。现已报道的有静置过夜,将沉淀用热水溶解后,分别在自来水及蒸[1][2][3]多糖、糖蛋白和蛋白质等不同成分的絮凝馏水中透析过夜,最后依次用95%乙醇沉淀、无水[4,5][7]剂。研究絮凝剂的化学组成及结构有利于进一乙醇、丙酮洗涤1～2次,真空干燥得粗产品。步阐明絮凝机理,为改造絮凝剂及提高絮凝效率提将得到的粗产品用少量热水溶解后与Sevag试供理论依据。本文介绍了一株链球菌A21分泌的微剂(氯仿、正丁醇按4
7、∶1比例)混合充分振摇。样品[8,9]生物絮凝剂的提取方法,并通过分析结果推测其化中的游离杂蛋白与Sevag试剂形成凝胶,采用分学性质及化学组成。液漏斗将凝胶去除,反复处理8～10次,至氯仿和水的界面无明显絮状沉淀为止。用冷乙醇对水层进行1材料与方法沉淀,将得到的沉淀用少量热水溶解后醇析,重复该111菌株及其培养条件步骤2～3次。链球菌A1为本实验筛选、保藏。培养条件、方基金项目:福建省科技厅资助项目(K020301);福建省自然科学基金法见文献[6]。资助项目(D0510011)112微生物絮凝剂的提取与分析收稿日期:2005-05-08;修订日期:2
8、006-06-0111211微生物絮凝剂的提取方法作者简介:陈盛(1957～),
