一株高活性产絮微生物的筛选及其培养条件优化.pdf

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1、2012年6月环境研究与监测第25卷课题研究（10~15）一株高活性产絮微生物的筛选及其培养条件优化褚可成(甘肃省环境监测中心站，甘肃兰州，730000)摘要：从兰州佛慈中药制药厂废水池旁采集的土样中分离筛选出了具有絮凝活性的微生物菌种4株，复筛后得到1株高活性微生物絮凝剂产生菌，测定了该菌株不同培养条件下发酵液对高岭土悬浊液的絮凝率。结果显示，葡萄糖30g/L、脲0.5g/L、蛋白胨1.3g/L、硫酸铵0.5g/L、磷酸二氢钾2g/L、磷酸氢二钾5g/L、氯化钠0.1g/L、初始培养基pH为5、三角瓶装液量

2、50mL、温度30℃、摇床转速175r/min、培养时间60h是该菌株的最佳培养条件。在该培养条件下，该菌株对高岭土悬浊液的絮凝率达94.11%。关键词：微生物絮凝剂；筛选；培养条件中图分类号：X787文献标识码：A文章编号：（G）01-0079（2012）02-10-06絮凝剂是一种应用广泛的水处理药剂，可使水筛选得到。1976年，Nakamuraj.等人从霉菌、细菌、放中不易沉淀的固体悬浮颗粒凝聚沉降．目前应用的絮线菌、酵母菌等菌种中筛选出19种具有絮凝能力的凝剂有无机高分子絮凝剂、有机高分子絮凝剂和天微

3、生物，其中以酱油曲霉(Aspergillussouae)AJ7002产然生物高分子絮凝剂。其中，无机高分子絮凝剂用量生的絮凝剂效果最好。1985年，TakagiH等人研究了[1]大，且易产生二次污染；有机高分子絮凝剂本身虽拟青霉素(Paecilomycessp.l-1)微生物产生的絮凝剂无毒性，但合成它们的单体是有毒的，并且在其生产PF101。PF101对枯草杆菌、大肠杆菌、啤酒酵母、血[2]和降解过程中释放的污染物会严重危害人体健康；红细胞、活性污泥、纤维素粉、活性炭、硅藻土、氧化微生物絮凝剂是一类由微生物

4、或其分泌物产生的代铝等有良好的絮凝效果。1986年，Kurane等人利用红谢产物，它是利用微生物技术，通过细菌、真菌等微平红球菌(Rhodococcuserythropolis)研制成功微生物生物发酵、提取、精制而得的，是具有生物分解性和絮凝剂NOC-1，对大肠杆菌、酵母、泥浆水、河水、粉安全性的高效、无毒、无二次污染的水处理剂。由于煤灰水、活性碳粉水、膨胀污泥、纸浆废水等均有极微生物絮凝剂可以克服无机高分子和合成有机高分好的絮凝和脱色效果，是目前发现的最好的微生物[4~5]子絮凝剂本身固有的缺陷，最终实现无

5、污染排放，因絮凝剂。此微生物絮凝剂的研究正成为当今世界絮凝剂方面本研究从兰州佛慈中药制药厂废水池旁的土壤[3]研究的重要课题。中分离筛选出具有絮凝活性的微生物菌株，对其培最早的絮凝剂产生菌是Butterfield从活性污泥中养条件进行优化，为高活性微生物絮凝剂的产生及其实际应用提供了基础数据。收稿日期：2012－03－261实验材料与方法项目来源：甘肃省科技支撑计划项目（NO：090NKCA079）；铁道部科技研究开发计划课题（NO：2010Z001-E）国家自然科学基金项目（NO：30870384）。1.1

6、菌种来源作者简介:褚可成（1985-），男，汉，河北人，研究生；研究方向：资源与采用兰州佛慈中药制药厂废水池旁的土壤作为环境微生物。实验样品。第2期褚可成：一株高活性产絮微生物的筛选及其培养条件优化展11[6~8]1.2菌种筛选絮凝率(％)=（A-B）/A×100％1.2.1分离培养基A：对照上清液550nm处的光密度值。B：样品牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌)、淀粉琼脂培养上清液550nm处的光密度值。基(高氏l号培养基，培养放线菌)、察氏培养基(培养1.5培养条件的优化霉菌)。1.5.1最佳培养时间的确定1

7、.2.2筛选培养基(GC液体培养基)将斜面菌种G-2接入到装有100mL淀粉琼脂葡萄糖20g，KH2PO42g，K2HPO45g，NaCl0.1g，培养基的锥形瓶中（两接种环），在30℃，150r/min的(NH4)SO40.2g，脲0.5g，酵母膏0.5g，水1L，pH=8.0，葡摇床中培养24h。将菌悬液按5%的接种量接入发酵22萄糖0.56kg/cm，其他1.05kg/cm，灭菌时间30min，培养基，在0h、12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h、96h葡萄糖用无菌水配成20％溶液。分

8、别取培养液测其絮凝率，并在660nm处测其吸光1.3菌种的初筛度用以表示微生物的生长量及各个时间段培养液的[9~在250mL三角瓶中装入100mL筛选培养基(GCpH，分析絮凝效果与微生物生长量及pH间的关系11]液体培养基)，灭菌后接种纯菌种（N1、N2、N3…，G1、。G2、G3…，C1、C2、C3…）。在温度为30℃的摇床中培1.5.2絮凝活性分布的测定养72h，摇床速度为150r/min，对