(胶体金法)生产工艺规程模板.doc

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1、.1.适用范围适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。2.职责研发部：制定本规程。生产管理部：执行本规程质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。3.内容3.1.依据《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）》产品标准3.2.产品名称、剂型、规格3.2.1名称：(1)商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）（2）英文名：DiagnosticKitforAntibodytoHepatitisBSurfaceAntigen(ColloidalGoldImmunochromatagraphicAssay)（3）汉语拼音名：Yi

2、xingGanyanBingduBiaomianKangtiJianceShiji（jiaotijinFa）3.2.2.类型：三类6840体外诊断试剂。3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4筒)（无卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）3.3.产品概述乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。当检测样本为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝

3、病毒表面抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（T）时与预包被的重组乙肝表面抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔IgG则在质控线（C）与羊抗兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（C）显色。3.4.试剂盒组成、储存、有效期3.4.1.试剂盒组成：组件100T/盒25袋/盒（1支/袋）50袋/盒（1支/袋）装量数量装量数量装量数量....试纸条25条/筒4筒无无无无试纸卡无无1支/袋25袋1支/袋50袋样品稀释液2ml4瓶2ml1瓶2ml2瓶说明书1份1份1份1份1份1份3.4.2储存条件：2-30℃保存。3.

4、4.3.有效期：24个月。3.5.生产工艺流程图文件末（23页）。3.6.生产工艺过程及工艺条件3.6.1配液根据以下各配方，按各相关试剂配制作业指导书进行配制。（1）原料名称用量配制环境：（2）原料名称用量配制环境：（3）....原料名称用量配制环境：3.6.2样品稀释液分装按照《液体分装作业指导书》，根据相应规格的装量要求进行分装，分装量＝规格+附加量。如下表所示（单位：ml/瓶）：标示量附加量装量15ml0ml15ml3.6.3胶体金制备原料名称用量烧金溶液A烧金溶液B超纯水制备环境：金标车间配料间（十万级洁净区）（1）量取ml超纯水到适当大小的烧瓶中；

5、（2）量取ml烧金溶液A并加入烧瓶中；（3）水沸腾后，加入已经平衡的烧金溶液Bml；（4）水继续沸腾5分钟关闭加热搅拌器，并将烧瓶移至桌面，用铝箔纸盖住瓶口，让胶体金自然冷却。（5）胶体金的储存：2～8℃；有效期6个月。3.6.4胶体金标记3.6.4.1根据试样验证结果，量取胶体金，快速搅拌中加入0.2MK2CO3液，....混匀后，快速搅拌中加入相应量的乙肝抗原或兔IgG(乙肝抗原和兔IgG分开标记)，混合均匀后，反应30分钟。3.6.4.2终止：充分反应后在搅拌中加入金标记过程终止液（20ul/1ml金溶液）；继续搅拌30分钟直至混匀。3.6.4.3将胶联

6、溶液离心，9000转离心6分钟，收集沉淀并用金工作液定容至总体积的1/10；3.6.4.4储存：2～8℃，有效期6个月。3.6.5铺金液配制3.6.5.1用工作液将1/10体积的乙肝病毒表面抗原金标记物沉淀放大10倍；兔IgG金标记物沉淀按1/3乙肝病毒表面抗原沉淀的量，加至上述乙肝金标工作液中（即兔IgG金标记物沉淀为乙肝的1/3）3.6.5.2按0.2mg/ml的量加入抗RBC到铺金液中；3.6.6小样试验：在铺金和划膜之前，应首先将待铺的基因重组抗原-胶体金复合物溶液，先铺一条玻纤（6mm×310mm）上，用配好的质控线液、检测线液划膜一张，与其他组分组

7、合在一起，进行检测，要求：阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-）应为20/20。灵敏度：灵敏度参考血清，呈阳性反应。精密性：连续重复测定精密性参考品10次，反应结果应均为阳性，且显色度均一。3.6.7铺金3.6.7.1按每张玻纤可以铺金36ml计算金标液的体积3.6.7.2按计算好的体积在每张玻纤上铺金，并用圆形试管刮均匀。3.6.7.330%湿度以下，37～40℃干燥18～24小时，如不立即使用，加干燥剂铝箔袋封存。3.6.7.4储存：保存过程中严格防潮，以后打开和使用一定要在30%湿度以下。3.6.7膜包被按照《划膜机标准操作规程》，以“252

8、”泵速（对应速度2.7ul/cm），将