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时间:2020-03-05
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1、基因工程(一)【考纲要求】基因工程的诞生A基因工程的原理及技术A基因工程的应用B蛋白质工程A【课前必记】【学习活动】1.下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程。请据图分析回答:⒈培育抗虫棉的操作水平、操作环境、操作的目的分别是什么?这种育种方法最大的优点?⒉获取Bt毒蛋白基因常用哪种酶?该酶的主要来源、作用特点、作用部位、作用结果分别是什么?⒊利用PCR技术可大量扩增目的基因,试比较DNA的复制和PCR技术,完成下表。体内DNA复制PCR技术解旋方式解旋每的作用引物类型一小段RNA片段DNA聚合酶一般遵循原则原料、模板数量增加方式⒋①过程需用哪种酶?上
2、图中的Ti质粒作为载体必须具备哪些条件?该质粒上的T-DNA具有什么特点?⒌①过程所构建的A中启动子、终止子的位置及功能分别是什么?标记基因的功能是什么?⒍图中培育抗虫棉所用的受体细胞是什么类型细胞?如果培育转基因动物常用的受体细胞是什么?⒎由目的基因能够插入到受体细胞染色体的DNA中说明基因工程得以成功实施的结构基础和物质基础分别是什么?若目的基因在受体细胞中没有成功表达,可分别用什么方法检测是基因表达的哪个阶段没有正常完成?2.仔细观察下面的表格和图解,然后思考、讨论有关问题⑴请分别写出限制酶BamHⅠ和限制酶SmaⅠ切割所识别的序列后的结果。⑵只用限制酶Hind
3、Ⅲ分别切割图2的外源DNA和图1的一个环状质粒,能分别得到几个DNA片段?⑶①基因工程中常用一种限制性内切酶切割目的基因和运载体的原因?②上图中若只用一种限制酶去切割质粒和外源DNA获取目的基因,应选用哪一种限制酶;用DNA连接酶处理切割后的质粒和所获得的目的基因(只考虑两两结合情况)能得到几种环状结果?如何解决其不足之处?③如果用不同的限制酶切割目的基因和运载体应选用哪两种酶?④切割后的目的基因两端若带有不同的黏性末端可否与运载体结合?其优点是?3.含重组质粒的受体细胞的筛选问题⑴步骤④:将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选。能在C中生长的
4、大肠杆菌有种。⑵步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落,分别接种到D(含和四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于(选填“D”或“E”)上,请在图中相应的位置上圈出来。【链接高考】2014各地高考真题1.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异2.下列关于基因工程技术的叙述,正确的是A.
5、切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达3.(多选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,下列叙述正确的是()A、过程①需使用逆转录酶B、过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞C、过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D、过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因4.植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并
6、将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的基因;而cDNA文库中含有生物的基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐旱基因整合到了(填“
7、同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。【检测反馈】1.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是。根据图示判断下列操作正确的是( )A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割C.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割D.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割2.下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是( )A.需要限制酶和DNA连接酶B.必须在细胞内进行C.抗生素抗性基因可作为标记基因D.启动子位于目的基因的首端3.基因工
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