针对血管早期炎症的双指标快速诊断试纸条的研制.pdf

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1、学校代码：10286分类号：Q5-33密级：公开UDC：543学号：151651针对血管早期炎症的双指标快速诊断试纸条的研制研究生姓名：陈伟导师姓名：张宇教授申请学位类别工学硕士学位授予单位东南大学一级学科名称生物医学工程论文答辩日期2018年6月7日二级学科名称生物医学工程学位授予日期2018年6月日答辩委员会主席钱卫平教授评阅人钱卫平教授郭志睿副研究员2018年6月7日硕士学位论文针对血管早期炎症的双指标快速诊断试纸条的研制专业名称：生物医学工程研究生姓名：陈伟导师姓名：张宇教授本论文获国家重点研发计划课题资助（2017YFA0205502）DEVELO

2、PMENTOFADOUBLE-INDEXTESTSTRIPFORTHEDETECTIONOFEARLYVASCULARINFLAMMATIONADissertation（Thesis）SubmittedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofEngineeringBYChenWeiSupervisedbyProf.ZhangYuSchoolofBiologicalScienceandMedicalEngineeringSoutheastUniversityMay2018东南大学学位论文独创性声明本

3、人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司、万方数据电子出版社、北京万方数据股份有限公司有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复

4、制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布（包括以电子信息形式刊登）论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布（包括以电子信息形式刊登）授权东南大学研究生院办理。研究生签名：导师签名：日期：摘要摘要心血管疾病（CVD）是心脏和血管疾患的统称，包括冠心病、脑血管疾病、周围血管疾病、心肌病等，心血管疾病作为威胁人类的头号死因，每年死亡的人数远超其它任何疾病。据统计在2012年有1750万人死于心血管疾病，占全球死亡总数的31％，其中，约有740万人死于冠心病，670万人死于中风，并且

5、心血管疾病造成的死亡率有逐年递增的趋势。心血管疾病的早期诊断对于疾病的预防、监控意义重大，对于能够预测心血管疾病的指标的快速诊断越来越引起人们的关注。近些年来，大量研究证实同型半胱氨酸（Hcy）的浓度和超敏C-反应蛋白（hs-CRP）的浓度是可以预测心血管早期炎症的两个独立指标，本论文建立了一种能够检测同型半胱氨酸和超敏C-反应蛋白的荧光免疫层析试纸，同时满足检测准确性的需求，具体工作内容如下：(1)构建出一种同型半胱氨酸荧光免疫层析试纸，使用同型半胱氨酸甲基转移酶（HMT）将同型半胱氨酸腺苷化，通过检测S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的浓度来检测同型半胱氨酸

6、的水平。检测基于竞争式的免疫层析原理，将生物素化抗体固定在结合垫，喷膜用量为2μL/cm，检测线为同型半胱氨酸牛血清白蛋白结合物（SAH-BSA），划膜浓度为2.5mg/mL。试纸条的检测线性范围为1.0-50.0μmol/L，最低检出限为0.26μmol/L，对半胱氨酸和腺苷甲硫氨酸有很强的抗干扰性，检测重复性（CV<10%）及稳定性良好。(2)制备出超敏C-反应蛋白荧光免疫层析试纸，基于双抗夹心原理，将标记抗体Ab1连接到荧光微球上形成探针，以1μL/cm的用量固定在硝酸纤维素膜前端，检测线抗体Ab2划线浓度为1mg/mL。试纸条的检测线性范围为0.3-

7、10mg/L，最低检出限为0.107mg/L，检测重复性好（CV<10%），对人血清样本的检测准确性良好(R2>0.999)，保存在37℃十天后稳定性良好。(3)制备出同时检测同型半胱氨酸和超敏C-反应蛋白的荧光免疫层析试纸，这种双指标联合检测试纸检测线性良好，能够很好的检测同型半胱氨酸，同型半胱氨酸的样本预处理过程导致超敏C-反应蛋白的检测浓度值与实际浓度值相比略低。对这种同型半胱氨酸与超敏C-反应蛋白双指标联合检测试纸的检测重复性进行了探究，在低浓度、中浓度及高浓度，同型半胱氨酸和超敏C-反应蛋白的检测变异系数均小于10%，重复性好，检测效果稳定。关键词

8、：同型半胱氨酸，S-腺苷同型半胱氨酸，超敏C-反应蛋