子宫内膜异位症患者VEGF的检测及意义.doc

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1、子宫内膜异位症患者VEGF的检测及意义作者：陈晓燕，李玉芳，魏萍单位：广东省深圳市龙岗中心医院妇产科，广东深圳【摘要】目的观察血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜异位症（EMs）发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学SP方法检测16例EMs患者异位内膜组织（A纽）、在位内膜组织（B组）中VEGF的表达,并与16例同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织（对照组）作对照。结果A组、B组和对照组的VEGF表达率分别为93.75%（15/16）、56.25%（9/16）、25.00%（3/16）,3组间两两比较差异均有统计学意义（P<O.OI或0.05）。结论VE

2、GF作为诱导血管形成的重耍因子，它可直接1佃特异作用于血管内皮细胞，导致新生血管形成，EMs患者在位及异位内膜VEGF的高表达，提示其在发病机制中起一定的作用。【关键词】子宫内膜异位症；血管内皮生长因子；免疫组织化学子宫内膜异位症（EMs）是一种妇科常见病，育龄妇女的发病率约占10%〜15%,不孕妇女则高达40%〜50%,口发病率呈逐年上升趋势，英发病机制尚不清处。目前认为异位子宫内膜却具有类似于恶性肿瘤转移、种植、侵袭等生物学特性，而此过程均依赖于新生血管的形成°血管内皮生长因子（VEGF）作为一•种主要的血管生成因子以其促进血管内皮细胞增殖、迁移，增加微血管通透性，促进

3、血管形成的生物学特性参与了子宫内膜生理以及病理血管生成。本研究通过检测16例EMs患者子宫内膜、异位内膜及16例子宫肌瘤患者止常子宫内膜中VEGF的表达，观察VEGF在EMs发生发展中的作用。1资料与方法1」病例与分组选择2006年9月至2007年11月在我院经腹腔镜或开腹手术，手术后病理检查确诊为EMs的16例患者为研究组,年龄24〜48岁,分为异位内膜组（A组）及在位内膜组（B组）;选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的16例患者正常子宫内膜为对照组，年龄35〜48岁。两纽•患者均月经周期规则（28〜30d）,术前3个月内均未用过内分泌药物治疗，无合并其它内外科疾病。1.2方

4、法1.2.1标本采集研究组及対照组患者均选择月经周期的卵泡期（6〜14d）取材，于术中无菌操作，研究组同时取在位及异位内膜。对照纽只取在位内膜，术中立即取材，经10%（体积分数）中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，5&mu；m连续切片5张，1张行常规HE染色进行病理形态学观察，其余用于免疫组织化学染色。1.2.2主要试剂鼠抗人VEGF讥克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。1.2.3SP法检测VEGF切片常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇至水。采用SP法进行免疫组织化学染色，实验操作严格按说明书进行。阳性对照选用VEGF免疫染色阳性的纽•织切片，

5、0.01MPBS代替一抗作为阴性对照。试验步骤严格按试剂盒操作步骤进行。1.2.4免疫组化阳性判断标准以细胞胞质屮出现棕黄色颗粒为判断标准，按FDA推荐的染色强度分级：阴性（一）；细胞无着色或阳性细胞数<5%；弱阳性（+）：细胞轻度着色呈淡黄色，阳性细胞数5%〜25%；阳性（）：细胞着色呈深黄色，阳性细胞数25%〜50%；强阳性（）：细胞明显着色，呈棕黄色，阳性细胞数>50%o1.3统计学处理对数据资料进行秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果结果详见表lo表1各组内膜VEGF的表达（略）3组间两两比较均P<0.01或0.05=3讨论EM

6、s真止的病因及发病机制至今未明。目前经血逆流种植学说为大家所接受，然而已知多数妇女经期均有经血逆流现象，却仅10%左右发病。因此，经血逆流可能只是发病的基础，而近來研究表明患者的内膜具有转移、种植、生长等类似恶性肿瘤细胞生物学行为的能力可能才是发病的关键。目前研究证实，恶性肿瘤的转移、种植及生长均依赖于新生血管的形成，而脱落的子宫内膜附着于腹膜或其他部位时，异位的子宫内膜及其周圉组织新的血供的建立与维持，亦是子宫内膜异位种植存活和发生的基本条件。VEGF是一种重要的选择性的促血管生成因子，以旁分泌方式作用于血管内皮细胞，促进其増殖并诱导血管生成［1］。大量的实验研究证实，几

7、乎所有的恶性肿瘤VEGF衣达都呈较高水平，而在周围止常纽织中无或仅有极低水平的衣达［2］。高农达的VEGF与其相应的受体特并性结合后,诱发肿瘤血管生成；持续和广泛的新生血管生成满足了肿瘤细胞生长所需的营养成分，促进了肿瘤细胞的恶性增殖和侵袭性生长。VEGF还是(2知最强的血管通透剂。肿瘤新生血管本身结构缺乏完整性，管壁薄弱，这使它们比止常成熟血管更容易被肿瘤细胞穿透，VEGF导致的血管通透性增加进一•步促进了肿瘤的侵袭性生长和转移。EMs的发生有赖于血管的生成。金海燕等［3］通过对VEGF在子宫内膜异位症患者中的检