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1、*pH对微生物的影响陈燕飞(太原师范学院生物系,山西太原030012)1摘要2溶液的酸碱度通常以氢离子浓度的负对数(即pH)来表示,培养基或环境中的pH对于微生物的生命活动有着密切的联系外,它的影响也是多方面的,因为环境的pH会影响到细胞膜所带的电荷,从而引起细胞对营养物质吸收状况的改变.此外,还可以通过改变培养基中的有机化合物的离子化程度,而对细胞施加间接的影响,改变某些化合物分子,进入细胞的状态,从而促进或抑制微生物的生长.微生物通常可以在一个较宽的pH范围内生长,但都有一个最适pH,在最适pH范围内酶活性最高,如果其他条件适合,微生物的生长率也最高.1关键词2微生物;p长H;生1
2、文章编号2167222027(2009)03201212041中图分类号2Q9361文献标识码2A微生物学作为一门学科,是在19世纪中期才发展起来的.这是因为当时在欧洲一些国家中,占有重要经济地位的酿酒工业和蚕丝业发生了酒变质和蚕病危害等问题,促进了微生物的研究,以法国科学家Pasteur和德国科学家Koch为代表,他们研究了微生物的生理活动,并与生产和预防疾病联系起来,为微生物学奠定理论和技术基础[1].现在人们对微生物的开发利用,不仅仅限于食品和医学方面,而是已经扩展到能源工业!冶金工业!化学工业!农业!林业!牧业以及环境保护等许多国民经济和人民生活的重要领域[2].在能源方面,提
3、高石油产量,可利用微生物或微生物的某些产品进行三次采油;在冶金方面,利用微生物浸出法,从贫矿或尾矿的矿石中溶取铜!铀!锰!锌!锑等,是一项颇有成效的技术[3];在化工方面,利用微生物生产各种醇类!有机酸!多糖!脂肪!氨基酸!维生素!抗生素!激素!和酶制剂等;在环保方面,利用微生物的降解作用处理废水!废物,消除污染!保护环境[4];在农业方面,微生物的利用更加广泛,尤其是生物固氮的研究,将来有可能使人类模拟生物固氮生产化肥,或利用微生物固氮基因让农作物获得固氮能力成为现实,这将会给农业带来一次革命性的变化[5].微生物与人类息息相关,它对人类的假定贡献和无法估量的开发潜力,为我们展开了广
4、阔的应用前景,所以研究微生物的生命活动有着重要意义,其中pH与微生物的生命活动有密切联系[6].为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献,将进一步探究pH对微生物的影响.1基本原理pH对微生物的生命活动有很大的影响,主要通过几个方面实现:一是使蛋白质!`核酸等生物大分子所带电荷发生变化,从而影响其生物活性;二是引起细胞膜电荷变化,导致微生物细胞吸收营养物质能力改变;其三是改变环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性.不同微生物对pH条件的要求各不相同,它们只能在一定的pH范围内生长,这个pH范围有宽!有窄,而其生长最适pH常限于一个较窄的范围,对pH条件的不同要求在一定程度上反映出微生
5、物对环境的适应能力.本实验选用大肠杆菌!金黄色葡萄球菌!酿酒酵母,分别在pH为3!4!7!9的培养基中培养,用比浊法测定菌液浓度[7].比浊法原理是在一定范围内,菌悬液中细胞的浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此用分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度(即OD值)表示菌量.2器材与试剂2.1菌种*收稿日期:2009204217作者简介:陈燕飞(19712),女,山西万荣人,硕士研究生,太原师范学院生物系副教授,主要从事微生物与免疫研究.大肠杆菌!金黄色葡萄球菌!酿酒酵母菌种各一支.2.2溶液或试剂无菌生理盐水!牛肉膏!蛋白胨!NaCl!0.1m
6、ol/L的HCl和NaOH溶液.2.3仪器或其他用品酸度计!酒精灯!高压灭菌锅!分光光度计!天平!试管!无菌吸管等.2.4培养基的配置本实验用牛肉膏蛋白胨培养基[8].其配方如下:牛肉膏3.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g水1000mL1)称量按培养基的配方比例依次准确的称取牛肉膏!蛋白胨!NaCl放入烧杯中.2)溶化在上述烧杯中先加入少于所需的水量,用玻璃棒搅匀,然后在石棉网上加热使其溶解,待药品完全溶解后,补充水到所需的体积.3)调pH取配好的培养基各50ml于四个小烧杯中.用酸度计分别调其pH为3!5!7!9.4)分装取pH为3的培养基各5mL于11!21!31号试管内;取p
7、H为5的培养基各5mL于12!22!32号试管内;取pH为7的培养基各5mL于13!23!33号试管内;取pH为9的培养基各5mL于14!24!34号试管内.5)加塞培养基分装完毕后,在试管口塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能.6)包扎加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以阻止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳捆好.7)灭菌将上述培养基以0.103MPa,121e,20min高压蒸汽灭菌
