PBS缓冲溶液的配制.pdf

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1、PBS标准配方如下（1L）：成分分子量终浓度（mM）用量（g）近似用量（g）半数用量（g）NaCl58.441378.0068.004.00KCl74.5512.70.2010.200.10Na2HPO4·12H2O358.14103.5813.581.79KH2PO4136.0861.760.2400.240.12理论上需要调pH，但在实际操作中，用蒸馏水或者超纯水配制后，pH在7.3左右，所以通常不用调pH。10×PBS配方如下（1L）：成分近似用量（g）NaCl80.0KCl2.0Na2HPO4·12H2O35.8KH2PO42.410×PBS保存于4℃时，会析出晶体，且

2、不易复溶，因此10×PBS要在室温保存。PBS在室温保存时容易长菌，应保存于4℃。关于PBS配方的比较与讨论：我们平时会用到PBS，但网上PBS的配方有多种，不知如何选择？参考一：看你的用途了。配方虽然有多种，但在“等渗”这个概念上相差都不大。常见的配方一般有三种：1、0.9%的生理盐水有些人也把它叫做PBS，实际上是错误的概念，它并没有“PB”，没有缓冲能力，纯化少用。2、pH7.3，137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，1.8mMKH2PO4。经验证，这种配方是没有办法加钙离子和镁离子的，会形成沉淀。此配方为0.01M的PBS，所对应的质量分别为8g

3、NaCl，0.2gKCl，1.44g（1.42g）Na2HPO4和0.24g（0.27g）KH2PO4。考虑到Na2HPO4通常为Na2HPO4·12H20，所以应该加3.58g。（修正过的）。这个配方比较常用的，含K，特别在分子生物学上常用。通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调pH、定容、灭菌消毒。3、pH7.2～7.4，20mMPB，150mMNaCl这个配方是蛋白质纯化常用的PBS，配制起来比较方便。

4、具体到称量方面，要注意试剂是否有结晶水，分子量是不同的。参考二：关键看用途，如果是要活性，要考虑你的目的蛋白在什么样的环境下稳定，主要是掌握好钠钾平衡和生理状态下离子强度，在此前提下有一定的缓冲能力。参考三：PBS是phosphate-bufferedsaline的意思。看看下面这个，或许对你有用ApplicationsPBShasmanyusesbecauseitisisotonicandnon-toxictocells.Itcanbeusedtodilutesubstances.Itisusedtorinsecontainerscontainingcells.PBScanb

5、eusedasadiluentinmethodstodrybiomolecules,aswatermoleculeswithinitwillbestructuredaroundthesubstance（protein,forexample）tobe'dried'andimmobilizedtoasolidsurface.Thethinfilmofwaterthatbindstothesubstancepreventsdenaturationorotherconformationalchanges.Carbonatebuffersmaybeusedforthesamepurpos

6、ebutwithlesseffectiveness.PBScanbeusedtotakeareferencespectrumwhenmeasuringtheproteinadsorptioninellipsometry.Additivescanbeusedtoaddfunction.Forexample,PBSwithEDTAisalsousedtodisengageattachedandclumpedcells.Divalentmetalssuchaszinc,however,cannotbeaddedasthiswillresultinprecipitation.Forth

7、esetypesofapplications,Good'sbuffersarerecommended.PreparationTherearemanydifferentwaystopreparePBS.Someformulationsdonotcontainpotassium,whileotherscontaincalciumormagnesium.Oneofthemostcommonpreparationsisdescribedbelow.ThesimplestwaytoprepareaPB