猪传染性胃肠炎病毒S基因片段的表达及鉴定.pdf

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1、旷ｔ＂Ｌ。＂誦＾＾：＾！猪传染性胃肠炎病毒５基因片段的表达及鉴定：－：ｆｅｉ．＾ｉ＾．１＾？ｄ＿＿．ｓｓ＾ｓｉｍ－？ｎｒ：＾ｒｉｇ完成时间２０１６ｌｉＪ—．生圃純代码：１０４８１学号：１０４２０１４１００５Ｓ级：不保密分类号：Ｓ８５２．６论文类别：应用研究＇濟角／洽净忠ｆ硕±学位论文猪传染性胃肠炎病毒Ｓ基因片段的表达及鉴定专业学位类别工程硕壬专业学位领域生物工程作者姓違辜森校内导师姚伦广教授校外导师曲立松富级工程师完成

2、时间２０１６年１０月４８１学校代码：１０学号：１０４２０１４１００５？密级：不保密分类号：Ｓ８５２．６论文类别：庭用研究南約坪洽净先硕±学位论文猪传染性冒肠炎病毒Ｓ基因片段的表达及鉴定李森专业違称生物工程举院為称生命科学与技术学院指导教师姓違（职称）姚伦广（教授）曲立松（高级工程师）申诸学位级别硕去论文提交日期２０１６年１０月３１日论文答辩日期２０１６年１２月１９日学位授予日期２０１６年１２月２９日■主席惠丰立答辩委贝会论文评阅人盲帘论文

3、评阅人盲审论文评阅人盲帘论文指导小组成员姚伦广教授曲立松高级工程师牛秋社副教授乔慧而副教授唐存多博去南阳师范学晓学位论文原创惟声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下完成的研究工作，所取得的成果和相关知识产权属南阳师范学院所有。除已注明部分外，论文中不包含其他人己经发表过的研究成果，也不包含本人为获得其它学位而使用过的内容。对本文的研巧工作提供过重要帮助的个人和集体，均已在论文中明确说明并致谢。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。Ｚ作者签名／

4、；签名日期；峰巧巧学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南阳师范学院有权保留并向国家有关部ｎ或机构递交本论文的印刷本和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权南阳师范学院可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用于本授权书）本学位论文属于：□保密在。＿＿年解密后适用本授权书，保密。作者签名；．导师签名：別＜＾么签名日期＞巧：年日签名日期；如年月巧日猪传染性胃栃炎病毒ｓ基因片段的表

5、达及鉴定目录ｍｍＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ第一章前言１１．１猪传染性胃肠炎１１．２ＴＧＥ的生物学特征２１．２．１ＴＧＥＶ的形态和理化恃征２１．２．２ＴＧＥＶ的蛋白结构与功能２．ＧＥＶ疫苗的研１３Ｔ究现状及发展趋势４１．３．ＴＧＥＶ疫苗的１现今研究种类４１３２ＴＧＥ．．Ｖ疫苗的研究发展趋势６．１．３３杆状病毒表达系统在研究中应用：７１．４ＴＧＥＶ的诊断及诊断试剂研究８１．５９本研究的目的和意义第二章材料与试验方法１１２．１

6、１１实验材料２丄１细胞、菌株和质粒１１２丄２酶和相关的试剂１１２丄３主要实验仪器１２２．２实验室的常用溶液和相应的配制试剂１３２．２．１琼脂糖凝胶电化试剂１３２．２．２相应的抗生素配制１３２．２．３细菌培养基的配制１３２．２．４Ｇｒａ１４ｃｅ昆虫细胞培养基配制２－．２．５ＳＤＳＰＡＧＥ凝胶电泳试剂的配制１４．２２．６蛋白免疫印迹所用的缓冲液１５．２３分子生物学的基本操作１５２．３．１质粒的提取１５２．３．２琼脂糖凝胶电泳１５２．３．３１６

7、琼脂塘凝胶回收２．３．４ＰＣＲ溶液回收１６２．３．５病毒基因组ＤＮＡ提取１６南阳师范学院硕±学位论文２．３．６ＣａＣｌ２法制取大肠杆茵感受态细胞１６－２ｉｄ／／／．３．７感受态细胞ＡｍＭ山ｉ旧ａｃｍＳＷ１０６ａｓｄｉｎｖ＋的制备１６２．３．８转化１７２．３．９转座和重组１７２３．１０１７．构建重组杆状病毒２ｌ．３．１１ＷｅｓｔｅｒｎＢｏｔ的操作步驟１８２．４昆虫细胞培养的基本步骤１９２．４．１细胞的复苏１９２．４．２细胞的传代及培养１９

8、２．４．３细胞的冻存操作．．．．．２０，２．５ＴＧＥＶＳ基因的相应目的片段２０２．６ＴＧＥＶＳ基因片段的ＰＣＲ扩增及克隆２１２．６．１ＴＧＥＶＳ基因片段的ＰＣ民扩增２１及测序２．６丄１引物设计合成２１２．６．１．２ＴＧＥＶＳ基