PEG修饰固定化金属离子介质的制备及应用研究.pdf

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1、巧古学化化文ＰＥＧ修饰固定化金属离子介质的制备及应丽究Ａ．ｊ心｜｜Ｈ細學如匯．说：Ｕ书吉二〇—前六自．＇＇＇＇‘Ｖ，斯满滋巧若．瓦二；荷分类号０６３６．１密级公开ＵＤＣ硕击学位论文ＰＥＧ修饰固定化金属离子介Ｍ的制备及应用研究何跃文学科专业生物化工指导教师廖丹葵教授论文答辩日期２０１５．０５．２７学位授予日期２０１５年６月３０号答辩委员会主席童张法教授广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的

2、论文，是本人在导师的指导下独立进斤研究所取得的研究成果，论文不包含任何其他个。除己特别加Ｗ标注和致谢的地方外人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大一学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归：属广西大学，即学校有。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ

3、将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行。检索和传播，可采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文本学位论文属于；□保密。，在年解密后适用授权回不保密。＂＂请在［＾上相应方框内打Ｖ（）＾如長．论文作者签名；＾心日期；指导教师签名：％日期；作者联系电话；电子邮箱：ＰＥＧ修饰固定化金属离子介质的制备及应用研究摘要ＡＣＥ是一ＡＣＥ血管紧张素转化酶抑制肤Ｉ类可抑制血管紧张素转换酶）（）（一活性的功能多狀，从酶解体系中分离纯化降血压狀是项十分耗时的繁琐过

4、程。近年出现的固定他金属离子亲和层析（ＭＡＣ）技术是利用金属离子与蛋白的藝合作用分离目标蛋白，虽然具有分离操作简便、处理量大、快速，等优势，但在实际应用中，由于金属离子与非目标大分子的非特异性吸附导致持异性结合位点的下降，分离效率降低。为提髙固定化金属离子亲和介质的分离效率，本文采用共沉淀法制备磁流体，通过乳液交联法制备壳二ｍＰＥＧ－进聚糖磁性微球作为亲和载体，采用醇基化聚乙醇单甲醋ＣＨＯ（）行修饰，蓄合铜离子（Ｃｕ气制备ｍＰＥＧ修饰固定化金属铜离子亲和介质ｍＰＥＧ血清白蛋白ＢＳＡａ

5、－（＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ气Ｗ牛（）作为模型大分子，孔清蛋白水解体系获得的降血压肤麵氨酷－丝氨酌－亮氨醜－脯氨醜－谷氨醜－色氨２＋酸（ＶＳＬＰＥＷ）作为模型活性多化。研究ｍＰＥＧ＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ在海合体系中对ＡＣＥｒ活性狀的分离效果，具体内容如下：共沉淀法制备的Ｆｃ３〇４为磁核，分别戊二酸、环氧氯巧烧为交联剂，采用乳液交联法制备了戊二酸交联、甲醋预交联环氧氯丙烧交联两种壳聚。糖磁性微球ＭＣＳ、ＦＥＭＣＳ，并对ＭＣＳ、ＦＥＭＣＳ的相关性能进行表征（），引入环氧基。Ｗ活化微球为基体对两种微球进行

6、活化，制备相应的＋２固定化金属铜离子亲和介质〇ＭＡＭ＠Ｃｕ）。２＋２＋ｍＰＥＧ－ＣＨＯ为原料ＭＡＭＣｕ，对固定化金属Ｃｕ亲和介质（＠）进Ｉ２＋行ｍＰＥＧ修饰改性，制备ｍＰＥＧ＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ。ＷＢＳＡ的吸附量与吸附２＋阻拒率为指标，优化了制备了ｍＰＥＧ＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ，最佳工艺为：ＭＣＳ１为基体１〇１左右，反应时间为２０１１，反应温度为４０。，配基密度为６９＾１１１杳２＋２＋庄ｃＨ〇：ｎ＿ＮＨ２为４：１，所得ｍＰＥＧ＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ相比相应的ＩＭＡＭ＠Ｃｕ，对’ｉ’ＢＳＡ

7、吸附量为２２．８ｍ对ＢＳＡ的吸附阻拒率为３７．４％左右。ｇｇ，最后，研巧ｍＰＥＧ＠ＭＡＭ＠ａ产对ＶＳＬＰＥＷ的吸附动力学，在ＢＳＡ与ＶＳＬＰＥＷ混合体系中对ＶＳＬＰＥＷ的吸附及对ＢＳＡ的阻拒效果。结果表２＋明：ｍＰＥＧ＠ＭＡＭ＠Ｃｕ对ＶＳＬＰＥＷ吸附动力学模型为伪二级动力学模型。２＋一在定条件下，ｍＰＥＧ＠ＩＭＡＭ＠Ｃｕ相比ＭＡＭ＠Ｃｉ产不仅对混合体系中的大分子ＢＳＡ具有阻拒效果，也能提升对ＶＳＬＰＥＷ的特异性吸附。关键词：ＰＥＧ修饰固定化金属离子介质应用ｎＰＲＥＰＡＴＡＴＩＯＮ

8、ＡＮＤＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＩＭＭＯＢＩＬＩＺＥＤＭＥＴＡＬＩＯＮＡＦＦＩＮＩＴＹＭＥＤＩＡＭＯＤＩＦＩＥＤＢＹＰＥＧＡＢＳＴＲＡＣＴＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅｉｎｈ化ｉｔｏｒｙｐｅｐｔｉｄｅ（ＡＣＥＩ）ｉｓｏｎｅｋｉｎｄｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｅｔｉｄｅｗｈｉｃｈｃａｎｉｎｈｉｂ