超支化固定金属离子亲和膜的制备及其吸附性能研究.pdf

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1、．？；厂Ａ．：０６３１分类号学校代码：１０６９７：公开学号密级：２０１２２０６５０ｋＪＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ－ＴｉＩ？士字位论文＇ＳＤＭＡＳＴＥＲＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ超支化固定金属离子亲和膜的制备及其吸附性能研究学科名称：高分子化学与物理作者：符瑞指导老师：卫引茂教授西北大学学位评定委员会二〇一五年西北大学学位论文知识产权声明书本人完全了解西北大学关于收集。、保存、使用学位论文的规定学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可

2、以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。）学位论文作者签名：狗指导教师签名：，■年‘月／）曰年月西北大学学位论文独创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的

3、材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢－ｔＶ．．琶、。学位论文作者签名：〈月Ｍ年／２日超支化固定金属离子亲和膜的制备及其吸附性能研究摘要固定金属亲和膜色谱具有可以在较短时间内处理大量的实际样品，低压降，容易扩大化生产等优点，因此在蛋白等生物大分子的分离纯化方面有潜在应用价值。但是与传统的以微球装柱的柱色谱相比，膜色谱比表面积较低，因而对蛋白的吸附容量较低，限制其分离效率的提高，。为提高蛋白的吸附量本文采用超支化方法对膜进行表面改性，一，增加吸附位点来提高蛋白的吸附量通过在表面引入更多的功能基团，制备

4、了种对于金属离子和蛋白都有较高吸附量的超支化固定金属离子亲和膜。同时研究了该改性膜对蛋白的吸附性能，并将其用于含组氨酸标签蛋白的分离纯化。首先通过两步反应在膜表面引入带有氨基的官能团，接下来将丙煤酸甲酯和乙二胺逐步加入，通过迈克加成反应和醜胺化反应在膜表面形成超支化结构，最后依次与环氧氯丙院和亚氨基二乙酸反应，再螯合金属离子制备了超支化固定金属离子亲和膜。用ＦＴＩＲ和ＸＰＳ表征了膜表面的化学组成。溶菌酶被作为模型蛋白来探宄蛋白的吸附性能，３该改性膜对于溶菌酶的最大吸附量为１６２ｍｇ／ｃｍ，高于文献报道值。同时探宄了溶液ｐＨ，离子强度，疏水作用和吸附时间对

5、吸附量的影响。将该改性膜用于蛋清中溶菌酶的，回收率可达到９４３，纯化．％比未超支化的固定金属离子亲和膜的回收率提高了５０％。最后用本文制备的改性膜从大肠杆菌粗提液中分离和富集含六聚组氨酸标签的天蚕抗－－ＥＧＦ菌肽Ｂ人表皮生长因子（ＣＢ融合蛋白，获得的蛋白纯度较高。所有这些结果证明）本文合成的超支化固化金属离子亲和膜在Ｈ－ａｅｄｉｓｔｇｇ蛋白的分离纯化方面有潜在的应用价值。－：Ｈｉｔ关键词再生纤维素膜，固定化金属离子亲和膜，ｓａｅｄ，超支化修饰ｇｇ蛋白分离ｉＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｍｅｔａｌａｆｉｎｉｔｙｍｅｍｂｒａｎｅｂ

6、ａｓｅｄｏｎｔ－ａｆｔｎｍｏｄｔｎａｎｄｒｏｔｅｎａｄｓｏｒｔｉｄｅｎｄｒｉｉｃｒｉｇｉｆｉｃａｉｏｉｏｎｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓｇｐｐＡＢＳＴＲＡＣＴＳｉｎｃｅｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｍｅｔａｌａｆｉｎｉｔｙｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＩＭＡＭａｌｌｏｗｓｔｈｅ（）ｒｏｃｅｓｓｉｎｏｆａｌａｒｅａｍｏｕｎｔｏｆｓａｍｌｅｉｎａｒｅｌａｔｉｖｅｌｓｈｏｒｔｔｉｍｅｌｏｗｒｅｓｓｄｒｏａｎｄｅａｓｉｅｒｐｇｇｐｙ，ｐｐｓｃａｌｅｕｐ．Ｉｔｈａｓｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ

7、ｉｎｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．ｐＨｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｆｏｒｍｅｍｂｒａｎｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｓｎｏｔｃｏｍｐａｒａｂｌｅｔｏｔｈａｔｆｏｒｔ－ｔｔｓｗｈｃｏｎｖｅｎｉｏｎａｌｂｅａｄａｃｋｅｄｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｏｒａｈｂｅｃａｕｓｅｏｆｉｌｏｗｓｕｒｆａｃｅａｒ