RFRP-3GPR147在黑线仓鼠的差异表达.pdf

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4、繁殖活动的现象。季节性繁殖动物通过整合光信号（光周期）与其它环境因子（食物丰度、温度等）来调控它们的繁殖活动。动物的生理状态随着外部环境信号的改变而改变。为了获得最大的繁殖成功率，季节性繁殖动物只在一年最适宜的某个时间段进行繁殖活动，以保证母体和后代最大的存活率。这也就造成了动物种群数量在季节间的波动现象。黑线仓鼠（Cricetulusbarabensis）是一种典型的季节性繁殖动物，在我国华北地区有广泛分布。它的繁殖活动受到外界光周期、温度、食物等因素的调控，黑线仓鼠在春、秋季节出现繁殖高峰期，季节间种群数量出现较大的波动。黑线仓鼠也是华北地区一主要

5、的农业害鼠，喜食作物种子；在作物发芽生长期，取食作物的茎和嫩叶，这样对农作物生产造成较大的损害，造成作物产量大大减少。华北平原主要是种植农作物，粮食作物主要为小麦和玉米，黑线仓鼠的大量繁殖，除了对该地区的农作物生产造成损失外，黑线仓鼠自身也极易携带可传播的病毒，对人们的健康生活也造成了一定程度的威胁。因此研究其繁殖机制、控制黑线仓鼠的繁殖活动，显得尤为重要。本研究以从山东省临沂市捕获的野生黑线仓鼠为实验材料，从与黑线仓鼠繁殖活动密切相关的繁殖基因入手，通过对黑线仓鼠进行不同光周期、限食和雌激素注射处理，利用实时荧光定量PCR技术，对不同方式处理的黑线仓

6、鼠不同组织中的相关繁殖基因的表达量进行分析。首先，以黑线仓鼠下丘脑为材料，利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术，克隆得到了GPR147的部分cDNA片段，长355bp，属于编码区序列。对不同季节黑线仓鼠下丘脑和卵巢、睾丸中的GPR147相对定量结果显示GPR147在下丘脑、睾丸中的表达模式均是非繁殖期表达量显著高于繁殖期（P<0.05），与黑线仓鼠的繁殖规律相一致，表明在黑线仓鼠的非繁殖季节，RFRP-3通过GPR147对黑线仓鼠的繁殖发挥抑制作用。其次，通过不同的光周期（16L:8D，12L:12D，8L:16D）处理黑线仓鼠，利用实时荧光定

7、量PCR技术，检测RFRP-3/GPR147等基因在雌、雄黑线仓鼠不同组织中的相对表达量。长光照周期处理的黑线仓鼠，雌、雄下丘脑中RFRP-3的表达量显著高于（P<0.05）短光照周期处理黑线仓鼠的表达。下丘脑中GnRH的表达量随着光照时间的增加，表达量显著增高，并且长光照周期下的表达量显著高于（P<0.05）短光照周期。下丘脑中雌激素受体（ER）的表达量短光照＞长光照＞中光照周期，并且短光照周期下的表达量显著高于（P＜0.05）长光照。下丘脑中GPR147的表达量短光照周期下显著高于（P＜0.05）长光照，与RFRP-3的表达呈现出相反的表达模式。实

8、验结果分析RFRP-3在长光照周期下表达上调，可能与黑线仓鼠机体中长光照下褪黑激素的分泌有关。