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时间:2020-03-03
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1、同路生物市场部免疫球蛋白与抗体孙鹤泳静免培训:第二篇抗体≠丙球≠免疫球蛋白白蛋白球蛋白球蛋白球蛋白正常血清免疫血清白蛋白球蛋白球蛋白球蛋白抗原正常人血清电泳图抗体(antibody,Ab):B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的能与相应抗原发生特异性结合的具有免疫活性的球蛋白。免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。分泌型(secreted~,sIg)主要存在于体液中,具有抗体的各种功能;膜型(membrane~mIg)是B细胞膜上的抗原受体(
2、BCR),识别抗原并启动B细胞的活化Ig不一定是Ab,如BCR,MHC(相容性基因复合体),骨髓瘤血清和尿中的免疫球蛋白BCellAntigenReceptor(BCR)Ig-Ig-Ig-Ig-BCellBCR的生物学效应:识别抗原表位,为B细胞活化提供抗原刺激信号B细胞表面的IgM和IgD是识别抗原的受体免疫球蛋白的结构重链(heavychain,H):2条;轻链(lightchain,L):2条;铰链区(hingeregion):位于CH1与CH2之间,含有丰富的脯氨酸,易伸展弯曲,而且易被木瓜蛋
3、白酶、胃蛋白酶等水解。可变区(variableregion,V区):近N端的1/2L链和1/4(或1/5)H链,氨基酸的组成及序列变化较大,而得名;恒定区(constantregion,C区):近C端的1/2L链及3/4(或4/5)H链。氨基酸组成在同一物种的同一类Ig中相对稳定。两轻两重链,连以二硫键,羧基端恒定(C区),氨基端可变(V区)可变区可变区超变区:重链和轻链V区各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变,称为超变(hypervariableregion,HVR)或决定簇互补决定区(complem
4、entarydeterminingregion,CDR),分别为CDR1、CDR2和CDR3。6个CDR组成一个抗原结合部位。骨架区:CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化,称为骨架区(frameworkregion,FR)。五种免疫球蛋白结构免疫球蛋白分为五类:IgM、IgD、IgG、IgA和IgE五种不同种类的重链:分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链,其氨基酸种类和排列顺序不同,抗原特异性不同。抗体的功能区或结构域功能区:是不连续,紧密折叠的区域,由重链和轻链经链内二硫键连接而成的球状结构,因具
5、有某种生物学功能,又称为功能区。AgBinding抗原结合位点ComplementBindingSite补体结合位点,活化补体PlacentalTransferIgG胎盘转移BindingtoFcReceptorsFC段受体,亲细胞活性同种异型抗原决定簇存在部位,遗传标志促进可变区与抗原表位结合;暴露补体结合位点,活化补体VLVHCLCH1CH2CH3抗体的功能区作用VH+VL一个抗原结合位点——结合抗原表位CH+CL种属型标志——Ig的免疫原性(IgG)CH2(IgM)CH3(IgG)CH2C1q的结合位点
6、——结合补体结合胎盘FcRn——介导IgG通过胎盘(IgG)CH3结合FcR——调理作用(MC,M,B,NK)ADCC(IgE)CH2+CH3结合FcR——I型超敏反应(肥大细胞,嗜碱性粒细胞)免疫球蛋白水解片段水解酶作用位点水解片段及其功能木瓜蛋白酶铰链区重链间二硫键近N端(1)两个相同的Fab段:可与抗原结合(2)一个Fc段:激活补体、结合细胞、通过胎盘胃蛋白酶铰链区重链间二硫键近C端(1)一个具有双价活性的F(ab’)2段:可同时结合两个抗原表位(2)若干个小分子多肽碎片(pFc’):无生物学作用
7、免疫球蛋白的生物学功能中和作用激活补体系统作用调理作用介导细胞毒作用(ADCC)诱导过敏反应作用跨越细胞膜作用(穿越粘膜上皮、穿越胎盘)调节作用CDR(互补决定区)特异性结合抗原(首要功能)抗体分子及酶解片段:Fab1价/单体(IgG,IgE,F(ab’)2):2价/二聚体(分泌型IgA):4价/五聚体(IgM):5价中和效应——中和毒素和病毒与Ag结合——促吞噬细胞吞噬中和毒素和病毒外毒素或病毒与抗体结合后,结合位点被抗体封闭阻止其进入细胞内毒素中和封闭病毒的Ab阻止细菌粘附固定并激活补体IgG1、IgG2
8、、IgG3和IgM通过经典途径补体IgG4、IgA和IgE的凝聚物,通过旁路途径激活补体IgD通常不能激活补体抗体与抗原结合后,可激活补体,发挥补体的生物学效应,导致病原微生物被裂解或吞噬。结合Fc受体——介导免疫细胞活性Ig可通过其Fc段与多种细胞表面的FcR结合,巨噬细胞、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞、中性粒细胞和血小板等都表达FcR,不同类别Ig可与不同细胞结合,产生不同生物学效应。介导调
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