砖红绒盖牛肝菌子实体原基培养及原基有无的转录组差异初歩分析.pdf

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1、分类号０８１密级么井ＵＤＣ巧号《煮＾聲硕去研《４緣化化式屈目巧红绒盖牛肝苗子实休原基拴堯及原基有无的巧录组差异巧巧分析Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｄ－ｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｗｉｔｈａｎｄｗｉｔｈｏｕｔｔｅｓｔｔｕｂｅｆｒｕｉｔｂｏｄｙＤｉｌｍｏｒｄｉｕｍｏｎ成ｗｏｗｉｗ￥。０成ｃｅｗ学院（所、中也）生命巧学学院专业名称生物工程研巧生姓名左奎学号１２０１３００２２８３导师姓名李桌菊职称副教巧２０１６年

2、５月扉页：论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中持别加Ｗ标注和致谢，不存在票１窃或抄的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研巧成果一袭行为。与作者同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。（现就论文的使用对云南大学授权如下；学校有权保留本论文含电子版），也可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部：分内容，可Ｗ将论文用于查阅或借阅服务学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入、社

3、会监督或评奖有关数据库用于检索服务。（内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研巧生签名：古重导师签名：嗦論曰期：王０１心／；．￣２〇夺云南大学硕±学位论文巧要牛肝菌属（度ｏ／ｅ化ｓ）隶属于担子菌口（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ）、伞菌纲ｔ）、，（Ａｇａｒｉｃｏｍｙｃｅｅｓ牛肝菌目（Ｂｏｌｅｔａｌｅｓ）、牛肝苗科（Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ）是该科中最一个属。大的。其广布于全球温带、亚热带和热带地区牛肝菌绝大多数与高等植一、，物根系共生形成外生菌根，因其子实体味道鲜美营养丰富药用价值高，是种深受人们喜爱的著名食用真菌。

4、牛肝菌除个别腐生种能在实验条件下驯化栽培外，绝大部份种类尚不能通过人工栽培形成子实体。目前市场上的产品完全依赖于野外采收，但随着生态环境的破坏Ｌ义及野生资源的过度开发，己不能满足日益増长的市场需求，难Ｗ可持续性利用。砖红绒盖牛肝菌（原ｒａｃｏｗｕｓ巧〇況ｃｅｕｓ）在牛肝茵属中具有典型代表性，且在云南分布广泛，在建立纯培养的基础上创新性地成。本文Ｗ砖红绒盖牛肝菌为研究对象功诱导出了试管子实体原基。通过山ｕｍｉｎａ高通量测序平台获取原基有无条件下的转录姐数据，基于转录组数据，通过差异基因表达分析确定可能参与子实体形成的候选。这为今后利用

5、基因工程调控子实基因，揭示牛肝菌试管子实体原基发生的分子机制了一体发育，为牛肝菌及其他珍稀野生食用菌根真菌的规模化人工培养提供定的理论依据。主要研究内容及结果如下：１．利用改良ＰＤＡ培养基，成功诱导出了砖红绒盖牛斤菌菌丝体及试管子实体ＩＴＳ，原基，结果表明菌丝体、原基皆来源，并利用分子标记对它们进行了鉴定于相应的子实体。２ＭＥＧＡＦＲＮＡＫ－ｔＲ０１．采用Ｏｕｎｇａｌｉ６８４０试剂盒提取子实体、菌丝体、原ＲＮＡ组测序分析。结果表明，６，４８．０８Ｇ基的，并对其进行转录个样品共获得的原始数据；Ｑ３０碱基百分比均大于８５％；

6、利用软件拼接后获得１５８４８８条Ｔｒａｎｓｃｒｉ口－Ｐｒｏ４９０５５条Ｕｎｉｅｎｅ这些Ｕｎｉｅｎｅ数据库ＮＲ、Ｓｗｉｓｓｔ、ＧＯ、ＣＯＧ、和ｇ；将ｇ与公共ＫＯＧ、ＫＥＧＧ中的序列进行比对，获得注释的Ｕｍｇｅｎｅ３４０８１个。子实体原基有无条件下的差异基因共有６８９个，３．差异表达基因的筛选表明，基中上调基因４４４个，下调基因２４５个。差异基因的ＧＯ分类表明，关联细胞组Ｉ云南大学硕±学位论文分的差异基因主要涉及细胞膜、胞外区域；分子功能的主要涉及催化、转运、结构分子、电子载体活性等；生物学过程中节律进程占有较高比率。差

7、异基因的ＣＯＧ一，般功能基因居多功能分类表明；其次是氨基酸转运和代谢，碳水化合物转运和，代谢复制、重姐和损伤修复。差异基因的ＫＥＧＧ代谢通路分类表明，１２９个差异基因，主要分布于淀粉和薦糖代谢（１４）、氧化磯酸化（１０）、糖酵解／糖异生（７）、７内质网蛋白质加工（）、拼接体７等代谢途徑中。（）关键词：砖红绒盖牛肝菌；试管子实体原基，培养；ＩＴＳ序列；转录组差异基因ＩＩ云南大学硕击学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔＢｏｌｅｔｕｓ置￥ａｌａｒｇｅｓｔｇｅｎｕｓｉｎＢｏｌｅｔａｃｅａｅｗｈｉｃｈｂｅｌｏｎｇｓｔｏＢｏｌｅ

8、ｔａｌｅｓ