细菌鉴定的总体思路.ppt

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1、临床常见细菌鉴定的思路检验科张诗海细菌鉴定的指南一、培养特性1、温度2、气体3、营养要求4、PH5、湿度细菌鉴定的指南二、生长特性1、生长速度2、菌落特征3、液体培养基的生长特性三、细菌的形态与染色四、生理及生化特性五、血清学诊断六、致病性试验：动物接种细菌的分类及鉴定步骤细菌的分类单位由高到低分7个层次，界门纲目科属种有的种还分血清型（如沙门菌及志贺菌等）和生物型（如流感、副流感嗜血杆菌1-8生物型等）还有噬菌体分型（如伤寒沙门菌、铜绿等）。细菌鉴定步骤1、首先必须分离有单个菌落的纯培养2、革兰氏染色，先确定是G-b，G+b，G+c

2、，G-c3、如为G-b，G-c先做氧化酶试验，如为G+c或G+b先做触酶，根据结果，选择最少几项关键性鉴定试验。G+c(动力、触酶、O/F)w/-F+O/-+F+/--F微球菌气球菌链球菌葡萄球菌革兰阳性球菌之葡萄球菌一、革兰阳性球菌，排列成葡萄状，触酶（+）：首先做血浆凝固酶试验、甘露醇、尿素及对新生霉素的敏感性，如果确定不了，再加做麦芽糖、蔗糖、蕈糖、木糖、硝酸盐，同时结合菌落颜色和溶血情况。几种常见葡萄球菌的鉴定凝固酶甘露醇尿素新生金葡++-S中间+--S表皮--dS腐生-++R溶血-d-S革兰阳性球菌之链球菌二、革兰阳性球

3、菌，排列成链状，触酶（-）：根据溶血情况，先做①七叶苷②6.5%NaCl③肉汤。β溶血：1、①-②-③沉淀生长，加做杆菌肽S为化脓性链球菌2、①-②-③微混，加做CAMP+为B群链球菌（无乳链球菌）3、①-②-③沉淀生长，加做杆菌肽R，为β溶血性链球菌（非A、B）4、①+②③沉淀生长，加做杆菌肽R，为咽峡链球菌（草链中的一种）革兰阳性球菌之—链球菌α溶血：1、①-或+②-③沉淀生长，为草链2、①-②-③混浊生长，加做胆汁溶菌试验+，菊糖+，OptochinS，为肺炎链球菌不溶血或α溶血：1、①+②-③混浊生长，为D群链球菌2、①+②+

4、③混浊生长，为肠球菌革兰阳性球菌如D群链球菌和肠球菌要进一步鉴定：D群链球菌乳糖+-牛链马肠链肠球菌山梨醇+-棉子糖甘露醇+-+-粪肠球禽肠球屎肠球坚忍肠球革兰阳性球菌之—绿色气球菌绿色气球菌是一种条件致病菌，它可引创面感染、败血症等。绿色气球菌在血平板上生长灰色、光滑、有α溶血的菌落。革兰染色为G+C，排列呈四联状。绿色气球菌生化反应试验+%试验+%试验+%触酶*0麦芽糖100阿拉伯糖48硝还*0蔗糖100棉子糖19七叶苷*100乳糖90木糖106.5%NaCl*100果糖100山梨醇0葡萄糖*100蕈糖90甘露醇*86水杨苷76*

5、为确诊试验革兰阳性球菌之—溶血孪生球菌本菌染色多变，可以染成阴性，呈单个或成双、短链排列。血板上35度培养24h形成较大的菌落，呈水滴状，易融合生长，48h后菌落周围出现宽大的透明溶血环，有自溶现象，类似肺炎链球菌的菌落。肉汤培养中呈混浊生长，6.5%高盐肉汤中能生长。生化反应：触酶-，氧化酶-，分解葡萄糖、果糖；不分解乳、麦、菊、蔗、阿拉伯糖、甘露醇、卫矛醇；七叶苷-，靛基质-。对青、氯霉素敏感，对丁胺卡那耐药。革兰阳性球菌之—马红球菌马红球菌是马、猪和牛的致病菌，近来发现本菌也可引起艾滋病、血液病和肾移植病人的肺部感染。本菌为革兰

6、阳性无动力杆菌，为多形态，有时呈杆状，有时呈球状。在血平板上35℃24-48h，可长出淡桔红色到粉红色的粘液样大菌落，不溶血。生化反应：触酶+，氧化酶-，硝还+，靛基质-，枸盐-，明胶酶-，脲酶不定，不分解糖类，可形成类CAMP样反应。G-c(触酶、氧化酶、O/F)++o脑膜炎奈瑟氏菌淋病奈瑟氏菌其他奈瑟菌布兰汉菌属金黄色奈瑟菌革兰阴性双球菌氧化酶+脑膜炎卡他布淋病双球菌兰汉菌奈瑟菌葡萄糖+-+麦芽糖+--硝还-+-DNA酶+G-b(动力、氧化酶、触酶、O/F)-++-莫拉菌属+++--++fw--++-+++0/f-++f+++F-

7、-+O/----F++++-+-嗜血杆菌黄色杆菌莫拉菌属假单胞菌巴斯德菌弧菌属不动杆菌产碱杆菌军团菌属弯曲杆菌属邻单胞气单胞++/--F肠杆菌科革兰阴性杆菌之—嗜血杆菌嗜血杆菌为G-小杆菌，在巧克力平板上生长灰色、透明的小菌落，似露滴状，有时呈球杆菌，有时呈丝状，一般情况下在血平板上不生长。氧化酶（弱+），在血平板和MH上同时做卫星试验，两种平板上均阳性，为副流杆菌嗜血杆菌，血平板上阳性、MH上阴性，为流感嗜血杆菌。注：杜克嗜血杆菌是软性下疳的病原菌，72h后才生长细小的菌落，阴道分泌物培养时要注意。革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验

8、涂片为革兰阴性杆菌，做氧化酶试验。1、氧化酶-做全套生化克氏双糖、尿素、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、葡萄糖、甘露醇、IMViC、硝酸盐革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验致病性大肠埃希菌克氏双糖、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、甘露醇、I