毛白杨蔗糖合酶PtSS基因家族成员的初步功能分析.pdf

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1、分类号咬廷２＾公客敬ＵＤ。ｉｌｊ＾ｉＴＨＥＳＩＳ３恆化文毛白杨藤糖合酶巧说基因家族成员的初步功能分析（中文题名）ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＳｕｃｒｏｓｅＳｙｎｔｈａｓｅＧｅｎｅＦａｍｉｌｙＭｅｍｂｅｒｓ戶紀Ｓｉｎ化芦／ｍｓｔｏ歷ｗｔｏｙ幻（）（英文题名）雷炳琪（作者姓名）安新＾教Ｓ指导教而±—申请学位级别硕学科专业名称林木遗传育种因组学与分子育种研究方向林木基２０１６年５论文提交日期２０１６年６月论文答辩日期学位授予日期答

2、辩委员会主席：评阀人；此素抹ｉｔ？大学国家重点基础研究发展计划国家重点基础计划项（）目０１２ＣＢ１１４５０５、北京市教育委员会科学研究与研究口）生培养共建项目ＢＪＣＸＹ２０１６１、国家自然科学基金项目（巧口１５７０６６１）、国家高技术研究发展计划（国家高技术计划）项目２０１３ＡＡ１０２７０３资助实验工作在北京林业大学林（），木育种国家工程实验室和林木花弁遗传育种教育部重点实验室完成特此谢化！，独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中轉别加Ｗ标注和致谢

3、的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得北京林业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名：奮姨為曰脱关于论文使用授权的说明本人完全了解北京林业大学有关保留、使用学位论文的规定：学校有权保留，即送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布论文的全部或部分内容，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。猶的论文請密后鐵守此规定）签名ｗｉＬＩＭ；當喊凌导师祭名：期：＿日＾巧要木材品

4、质改良是林木遗传育种领域的重要研究课题么一素是细胞壁的主要，纤维成分－Ｇ通过－，与木材品质密切相关。纤维素是由ＵＤＰＰＭ糖巧键链接而成的多聚－ｃｒｏｓｅｎｈ－（ＳｕＳｔａｓｅＳＳ）催化庶糖分解为ＵＤＰＧ和果糖ＵＤＰＧ物，薦糖合酶ｙ，，而。为纤维素合成的底物，对于纤维葡聚糖链的聚合延伸具有至关重要的作用因此，开展毛白杨庶糖合酶Ａ说基因家族成员功能的研究，对于探究Ａ说基因家族成员在木材形成的分子机制具有重要的理论意义，同时，对于通过基因工程改良木材品质具有潜在的应用价值。该研究＾毛白杨为试材，在前期克隆部分毛白杨庶糖合酶基因家族成员及其

5、启动１＾ａｍ子，构建ｉＲＮＡｉ，，Ｗ及构建了部分基因成员正义表达载体的基础上了９个载体一通过农杆菌介导在杨树中进行了遗传转化，，经ＰＣＲ检测鉴定获得阳性植株进步Ｔ－ＰＣＲ分对转基因株系进行了Ｒｑ析、酶学活性测定分析和糖代谢变化相关分析，对毛白杨庶糖合酶部分基因家族成员的功能进行了初步鉴定。主要研究结果如下：－－化粧２－１、采用ａｍｉＲＮＡｉ技术构建了ａｍｉＲＮＡｆ议Ｗ、ａｍｉＲＮＡ、ａｍｉＲＮＡ化ＳＷ、ａｍ－化班４ａｍ－ａｍ－ｉＲＮＡ、ｉＲＮＡ戶巧旅和ｉＲＮＡ化猫７共６个单基因干扰载体Ｗ及－－－ａｍ－Ａ游／、ａｍ－化猫Ｍ和ａ

6、ｍｉＲＮＡ２ｉＲＮＡｉＲＮＡｆ议说７共３个双基因干扰载体，巧杨树中进行了遗传转化，经ＰＣＲ检测获得１５个ａｍｉＲＮＡｉ转基因株系，经扩繁得到９０个植株。－、－ｉｍｉＲＮＡ／化妨３２ＲＴｑＰＣＲ分析表明，ａｍｉＲＮＡ转基因株系（ａｆ议５７／仍城４）对应的巧说成员的ｍＲＮＡ－ｆ议Ｗ／ｆ议Ｗ／ｉＷＷ）表达量（ｍＲＮＡ在不同组织中均明显下ｍＲＮＡ在茎和叶调，而，；其他两个成员的中的表达量无明显变化在根中－－ａｍｉＲＮＡ－巧况７转基因株系的ｍＲＮＡ化Ｓ拟和ｍＲＮＡ－Ａ说￥上调ａｍｉＲＮＡｆ议妨转，－－戶议Ｗ上调ａｍ－－巧放／和ｍＲＮＡｉＲＮＡ

7、化班４的ｍＲＮＡ戶议Ｗ上调基因株系的ｍＲＮＡ，，可能是由于根中不同成员之间的代偿效应所致；正义表达转基因株系ｒｏ－／ｔＰ怯Ｓ１／Ｐ记Ｓ２／Ｐ设Ｓ３）中Ｐ怯Ｓ威黄对应胸ＫＮＡ（ｍｍＡＰ怯Ｓ１Ｐ紀Ｓ２／Ｐ讫Ｓ３）衰化量在不同组织中均上调，其他两个成员ｍＲＮＡ表达量则没有发生变化。３、庶糖合酶活性测定分析表明，３个ａｍｉＲＮＡｉ结构不同转基因株系的庶糖合酶＞活性在茎和叶中明显下降，但在根中无明显变化；在ｆ紀Ｗ、／议拍正义转化不同株Ｉ系根、茎、叶组织中庶糖合酶活性明显上升，在ｆ议拟正义转基因株系中，茎、叶中。煎糖合酶活性显著上升

8、，而在根中则保持不变总的