小麦重结晶抑制蛋白IRI基因功能及小麦族IRI基因家族的分子进化.pdf

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1、乂／ｆ读义嗦４巧女嗦化俗头小麦重结晶抑制蛋白ＩＲＩ基因功能及小麦族ＩＲＩ基因家族的分子进化研巧生：斬亚楠指导教师：郭志富副教授专业名称：生物化学与分子生物学研究方向：抗逆分子机制所在学院：生物科学巧术学院２０化年６月■？■－，＞Ｉ：Ｔ＇ｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒｓＤｅｇｒｅｅＦｕｎｔｉｏｎｏｆＩｃｅＲｅｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎＧｅｎｅｆｒｏｍＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍａｎｄ

2、ＥｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆＩｃｅＲｅｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎＧｅｎｅＦａｍｉｌｙｆｒｏｍＴｒｉｔｉｃｅａｅＣａｎｄ－ｉｄａｔｅＪｉｎＹａ：ｎａｎ－Ｓｕｅｒｖｉｓｏｒ：ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏ拓ｓｓｏｒＧｕｏＺｈｉＦ。ｐＳｐｅｃｉａｌｉｔｙ；ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＦｉｅｌｉｔｒｌｄ：ＭｏｌｅｃｕａｒＭｅｃｈａｎｓｍｏｆＳｅｓｓ艮ｅｓｉｓｔａｎｃｅＣｏｌｌｅｇｅ：Ｃｏｌ

3、ｌｅｇｅｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＳｈｅｎｙａｎｇＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＪｕｎｅ２０１６，独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生

4、签名：斬衫＾时间：兴ｌｉ）年Ｓ导师签名：时间：年／月曰关于论文知识产权和使用授权的说明本论文的知识产权为沈阳农业大学所有。本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使目，用学位论文的规定，Ｐ；学校有权保留送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借１阅，可＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意沈阳农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的内容。学位论文中的所有内容不经沈阳农业大学授权不得Ｗ任何方式擅自对外发表。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签

5、名：时间：Ｈ年ｂ叫Ａ导师签名＾：时间：年／月７曰沈阳农业大学硕±学位论文目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３第一章文献综述５１１Ｓ５．ＡＦＰ的概述１丄１ＡＦＰｓ的发现５Ｕ．２ＡＦＰＳ的分类及将点５１丄３ＡＦＰｓ的性质７１．２植物ＡＦ化的研巧进展８１．２．１植物ＡＦＰｓ的特性８１ｓ９．２．２植物ＡＦＰ结构特点１．２．３植物ＡＦＰｓ的高级结构９１．３ＡＦ化的应用１０３１０１．１ＡＦＰｓ．在食品领域的应用１．３．２

6、ＡＦＰｓ在农业领域的应用１０１．４小麦族ＡＦＰｓ研究进展１１第二章强冬性小麦１３ＩＲＩ基因的分离、序列比对及表达分析１３２．１试验材料２丄１植物材料与处理１３２丄２茜株及质粒１３２丄３其它试剂１３２丄４所用仪器及生物学软件１４２１４．２试验方法２．２．１总ＲＮＡ的提取１４一２．２．２反转录合成第链ｃＤＮＡ１４２．ＣＲ扩増１４．２３脱基因的Ｐ５２ＰＣ民扩増产物的胶回收１．２．４２．２１５．５ｍ克隆２２１５．．６序列测定

7、与分析ｉ目录２．２７．实时巧光定量ＰＣ艮１５２．３结果与分析１７２．３．１植物总ＲＮＡ的提取１７２．３．２小麦ＩＲＩ基因的分离１７２．３．３小麦ＩＲＩ氨基酸序列比对及结构分析１８２．３．４小麦ＩＲＩ基因家族分子进化分析２１２．ＩＲＩ．３５小麦基因家族各成员表达分析２１２．４结论２３第兰章转基因烟草检测及抗寒功能鉴定２４３．１２４试验材料３丄１植物材料与处理２４３丄２试验试剂及配制２４３丄３所有仪器及生物学软件２５３．２实验

8、方法２５３２１．．探针的制备２５．３２．２探针浓度的定量标记２６３ｔｈｅｒｎ２６．２．３Ｓｏｕ杂交步骤３２．４．低温胁迫试验２７３．３结果与分析２８３．１．３定量标记探针效率结果２８３．３．２Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果２８３．３．３表型鉴定结果２９３４．３．存活率测定３０３．３．５低温胁迫下转基因烟草相