干巴菌及松乳菇分离物的分子鉴定和优化培养.pdf

《干巴菌及松乳菇分离物的分子鉴定和优化培养.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Ｖ■分类号０９３密级公开ＵＤＣ编号《＊若Ａ聲巧女研《４《化讼Ａ题目平田葡及化現党分寓物的分子鉴定巧优化培养ＴｉｔｌｅＭｏｌｅｃｕｌａｒｉｄｅｎ村ｆｋａ村ｏｎａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＴｈｅｌｅｖｈｏｒａｓａｎｂａｉｕｎ’ａｎｄＺａｃ化／７ＭＳ沁／ＺｃＺｏｓＭｓｉｓｏｌａ化ｓ学院（所、中心）生命科学学院专业名称微生物學祝巧牛姓备王康康学号１２０１３０００８８８导师姓名沙藻职称副研究员

2、＿－导师姓名张亚平、院±＿＿＿＿职称教授２０１６年５月？－，、论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。餘了文中特别加Ｗ标注和致谢，的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果不存在割窃或抄袭行为一。与作者同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可Ｗ将论

3、文用于查阔或借阅服务送义学位论文用；学校有权向有关机构于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。（内部或保密的论文在解密后应遵循比规定）兰研究生签名－：＾乐旅导师签名：巧念日期；叫云南大学硕±学位论文摘要７７口ｎ６ｗＺａｎ）（ｒＡｏｒａ），干己菌（ｚｅ／ｅ如ｏｒａ各ｑ／ｚｇ在分类学上隶属革菌属＆ｅ／巧’‘一种外生菌根真菌ｃｔｏｎｗ成化是云南省特有的。松乳茹（Ｉｆｌ７ｏｓｗ）是乳茹属一（ＺａｃｔｅＷｗ）的种外生菌根真菌。两

4、者均可与云南松共生，但干己菌的分布范围更狭窄，所Ｗ对其的研究较少。松乳茹与干己菌生长环境类似且有关研究较多，对干Ｅ菌的研究具有参考价值。由于至今没有成熟的人工技术可Ｗ控制子实体的产生，与市面上熟知的腐生食用菌，例如灵芝、金针茹，不能人工条、木耳等完全不同件下依靠精确的温度、湿度、营养条件进行全年生产，只能完全依赖野生采集。特别是干己菌在自然条件下发生率比其他菌根真菌低，所＾心产量更低。由于从菌根组织或子实体中分离菌根真菌困难重重，且很多菌根真菌在人工培养基上生长缓慢或无法生长，因此可

5、食用菌根菌的菌种分离鉴定、优化培养是目前该研究领域比较紧迫的任务。本研究的目的是通过优化分离方法，、松乳茹纯培养菌丝体获得干己菌；通过单因子试验和正交试验探究分离自云南省玉溪市及昆明市小哨乡的干己菌分离物的最适营养条件及ｐＨ值，，通过对比有关文献中松乳茹培养基的优化结果得到松乳觉分离物的适宜培养条件，尽量缩短培养时间，获得大量菌丝体Ｗ备接种之用；比较两个干己苗菌种在生理特性及不同基因片段序列上的区别；进行菌根合成试验。主要研究结果如下：一Ｌ通过组织分离法获得了松乳茹纯培养物一，建立了

6、种新的分离法空气传导分离法Ｗ获得干己菌纯培养物。２．小哨乡的干己菌分离物的最适培养条件为葡萄糖２０ｇ，蛋白腺２ｇ，酵母提取物２ｇ，硫酸镇０．５ｇ，磯酸二氨钟０．５ｇ，初始ｐＨ５．５，水忙；来自玉溪的干己菌分离物最适培养基为葡萄糖２０ｇ，硫酸较４ｇ，酵母提取物２ｇ，硫酸镇０．５ｇ，憐酸二０．５Ｈ化ｌＯ氨钟ｇ，初始ｐ５．５，水；松乳茹分离物的最适培养条件为葡萄糖ｇ，蛋白腺４ｇ，酵母提取物２ｇ，硫酸镇］ｇ，憐酸二氨巧Ｉｇ，ＰＤＡ培养基１Ｌ。３．ＷｒＲＮＡＩＴＳ序列作为标记基因，对二个分离物进行

7、了分子鉴定，确定分离１云南大学硕±学位论文物分别为干己菌和松乳茹的苗丝体。干己苗两个菌种在ＩＴＳ基因片段上碱基序列无差异；１２ｓＲＮＡ基因片段上碱基序列有Ｉ个位点的差异；１６ｓＲＮＡ基因片段上碱基序列有２个位点的差异：ＴＵＢ基因片段上碱基序列有１个位点的差异。４．菌根合成得到分别带有干己菌及松乳茹菌根的云南松松苗。关键词：ＩＴＳ序列鉴定生菌根真菌干己斬纯培养；：外；菌根合成ｎ玄南大学硕±学位论文Ａｂｓｔｒａｃｔ．ＴＴｅ／ｅ／ｒａＷＭａｓｅｃｉ＾ｉｅｓｋｎ

8、ｄｏｆＥＣＭｆｔｉｎｉＩ口ＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅｉｓａｐｚｏ各幻ｗＡ巧，ｐｇ，ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｆｔｉ打ｇｕｓｏｆｔｈｅＴＴｚｅ／ｅｐ＆ｏｒ幻ｆａｍｉｌｙ．Ｚ）£／／ｃ／０ｓ化ｙｉｓａｌｓｏＥＣＭｆｉｉｎｇｉ（Ｌａｃｔａｒｉｕｓ）．Ｂｏｔｈｏｆｔｈｅｍｃａｎｓｙｍｂｉｏｓｅｗｉｔｈ