带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白对介体取食行为和传毒率的影响.pdf

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4、Ｕｕｓｏｎｔｈｅ化ｅｄｉｎｇｂｅｈａｖｉｏｒａｎｄｖｉｒｕｓｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｖｅｃｔｏｒＢｙＨｕａｎｇｌＡｊｕｎ乂ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳＵＢＭＩＴＴＥＤＩＮＰＡＲＴＩＡＬＦＵＬＦ圧ＬＭＥＮＴＯＦＴＨＥＲＥＱＵＩＲＥＭＥＮＴＳＦＯＲＴＨＥＤＥＧＲＥＥＯＦＭＡＳＴＥＲＷＩＴＨＭＡＪＯＲＩＮ乂ＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＩＮＳＥＣＴ＆ＰＥＳＴＣＯＮＴＲＯＬＡＤＶＩＳＯＲ：ＰＲＯＦＥＳＳＯＲＬＩＵＦａｎ

5、ｇＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＪＩＡＮＧＳＵＹＡＮＧＺＨＯＵＣＨＩＮＡ，，ＭＡＹ２０１６，本研究受国家自然科学基金（项目编号；３１１７１８４２）项目资助摘要灰飞風是是亚洲稻区水稻上的重要害虫，可传播水稻条纹叶枯病毒（Ｒｉｃｅｓｔｒｉｐｅｖｉｒｕｓ，ＲＳＶ）造成水稻条纹叶枯病的流行。民ＳＶ隶属于纤细病毒属，主要一由灰飞風Ｗ持久，而民ＳＶ、循回增殖型方式传播。唾液腺是民ＳＶ传播需要克服的屏障之－－克服唾液腺屏障的机制尚缺乏研究。前期的研究发现，带毒灰飞風唾液腺

6、中ａ亚基ＡＴＰ合酶（ＡＴＰｓｙｎｔｈａｓｅｓｕｂｕｎｉｔａｌｐｈａ）、线粒体内膜移位酶（Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｉｍｐｏｒｔｉｎｎｅｒｍｅｍｂｒａｎｅ－ｍｅ－－ｔｒａｎｓｌｏｃａｓｅ）、苹果酸脱氨酶（ＮＡＤＰｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｌｉｃｅｎｚｙ）、微管蛋白ａ２（Ｔｕｂｕｌｉｎ－－体Ｌ４０－ｒａｌｐｈａ２）、泛素６０ｓ核糖前体（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ６０ＳｒｉｂｏｓｏｍａｌｐｏｔｅｉｎＬ４０ｒｅｃｕｒｓｏｒ）Ｗ及ｐ－ａｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｓｅｃｖ电压依赖型阴离子通道蛋白（

7、Ｖｏｌｔｇｔａｎｉｏｎｌｅｔｉｅ浊ａｎｎｅｌＶＤＡＣ）等６个蛋白，５的表达水平显著离于无毒灰飞風唾液腺；带毒灰飞動唾液腺中前个蛋白基因的表这水平亦显著髙于不带毒灰飞風。本论文研巧了电压依赖型阴离子通道蛋白的氨基酸全长序列及基因表达，并用ＲＮＡ干扰研究了上述６个唾液腺差异蛋白基因对介体取食行为和传毒率的影响。主要结果如下：（１）利用ＲＡＣＥ技术，从携带ＲＳＶ的灰飞風体内成功扩增出全长为１４６４ｂｐ的电压依赖型阴离子通道蛋白核巧酸序列。将全长核昔酸序列提交到ＮＣＢＩ的ＧｅｎＢａ址数据库中

8、，命名为ＬｓＶＤＡＣ。采用实时定量ＰＣ民的方法对ＬｓＶＤＡＣ基因表达进行相对定量，结果发现带毒灰飞風唾液腺和全身中ＬｓＶＤＡＣ基因的表达均盘著上调，。与不带毒灰飞相比带毒灰飞風唾液腺中ＬｓＶＤＡＣ基因的相对表达量提高了４９．２％灰飞動虫体中ＬｓＶＤＡＣ；基因的相对表达量提高了６．１％。－－ＡＴＰ合酶基因（２）采用民ＮＡｉ法研究了ａ亚基（