毕业论文(设计) 云芝多糖的提取分离.doc

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1、云芝多糖的提取分离第一章文献综述云芝是担子菌纲云芝属的一种杂色菌,腐木生,是珍贵的药用真菌,其子实体具有清热消炎Z功效,临床上用于治疗慢性气管炎,慢性肝炎等疾病⑴。这只要是和云芝多糖密切相关,云芝多糖(PSK)是从扌口子菌纲云芝(Coriolusversicolorinbasidiomycete)中提取的一种蛋白质多糖,它具有免疫调节功能,已用于肿瘤和炎症的辅助性治疗囚。它能激活免疫细胞,提高机体免疫功能而对止常细胞没有毒副作用⑶。根据张翼伸等的报道⑷,用水醇提取法从天然云芝子实体屮分离提取,获得了糖和蛋白含量较恒定的蛋白结合多糖,通过对其生物学

2、效应的研究,发现小鼠腹腔注射PSK有提高其腹腔巨噬细胞硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGSIIPx)的活性和基因表达水平,保护巨噬细胞免受tbOOII和氧化修饰LDL(Ox-LDL)引起的脂质过氧化物损伤宀先现在除了用水醇提取法以外,还有的人采用盐提法,酸提法甚至超声波法等等。1.1水提法不同因素的比较1.1.1真菌多糖提取条件影响真菌多糖提取率的因素很多,有培养方法,提取原材料的状态,温度、介质、介质浓度、提取时间、浸提次数、原料的预处理等等,做真菌多糖的提取时要充分考虑到这些因素,因为一个因素的不同就会对提取量造成很大的影响。1.1.2原材料对多糖

3、提取的影响真菌原材料的不同对多糖的提取会产牛一定的影响,有研究指出姬松茸菌丝体的多糖提取率高于子实体〔口。而香菇现在则多从子实体屮提取多糖,当存在着周期长,成本高等问题。血且就算同是从云芝屮提取多糖,还有野生和栽培Z分,根据田光辉等人的研究,发现栽培的云芝用水提法提取出的多糖含量要高于野生菌株。1.1.3提取方法的比较水提法屮还包括了不同的提取方法,有干提法,湿提法等等。参考国内外已有的研究资料,基本可以归类为三类:A.将湿菌丝体不做任何处理,直接加水提取;B.将菌丝体烘干,粉碎,加水提取;C.将菌丝体用组织捣碎机捣碎后,加水提取。在香菇多糖的提

4、取屮组织捣碎法得到的多糖量最高⑴】。1.1.4不同加水比例对多糖提取的影响首先,先看水体积对提取的影响,用水来提真菌多糖的方法与加入其屮的水的体积有着密切的关系,不同的真菌对水的比例会有不同的要求。耍是水的体积没有达到一定的程度就会严重的影响提取的效果,提出的多糖量会变得很少,人部分的真菌多糖最佳提取水比例为1:30,如灵芝、平菇等。根据臧晋、黄开勋的研究,灵芝多糖的提取水体积-•般为1:30o要是在这个比例之下它的提取效果会非常得不好,要是水的体积再增加它的提取量增加的也就不显著了。而在提取银耳多糖时水的最佳比例是1:50n21o相比较而言,水

5、对口灵菇多糖的提取影响很大,在1:30〜1:40时效果最好。若加水过少,多糖浓度过高不利于多糖的浸出,若加水过多则浸提液过多不利于以后的分离口引。也有低于1:30这个比例的,像五味子多糖得提取,它的水比例在1:25之后影响就不明显了〔⑷。而从茶薪菇发酵菌丝体屮提取多糖只需要加入10倍的蒸馆水[①。1.1.5不同提取温度对多糖产率的影响温度是多糖提取的关键因索之一。对于平菇来说在90°C的条件下提取可以达到较高的多糖得率。温度过低则溶剂的渗透能力和溶剂能力降低,使多糖不能有效溶出,温度过高则导致多糖得破坏,使多糖得率降低〔⑸。而白灵菇的提取温度一般

6、在80〜90°CZ间,温度对它的影响和平菇是类似的〔⑶。温度对五味子多糖的提取率有显著的影响,温度的上升伴随着多糖提取率的显著上升,在100°C条件下多糖得提取率几乎是85°C吋提取率的两倍I⑷。银耳相对于以上几种真菌要显得特殊一些,它的多糖在提取时要经过一个灭酶的过程,因为它在水提时要加入1%的果胶酶。它先在45°C得水浴屮浸提,在98°C经过灭酶后再保温浸提【⑺。1.1.6不同提取时间对多糖产率的影响一般而言,随着浸提时间的增加,多糖得提取率也有所增加,但是,这种增加会有一种减慢的趋势,找出提取的最佳时间能够人人的提高提取的效率。当然,不同的

7、真菌会有不同的最佳吋间点。以平菇为例,平菇的提取时间是属于比较长的,要达到7〜8个小吋,8个小吋以后它的提取量增加程度会明显的下降〔⑹。需要较短时间的有茶薪菇菌丝体,它的提取时间一般设为4个小时W。在同等条件下,白灵菇提取3〜4个小时较为合适3。根据专家对姬松茸的研究,在94°C条件下,提取两次,以1:25的比例加水则发现,在时间低于3小时时,得率随提取吋间的延长增加很快,超过3小吋后则增加缓慢。这表明,产物溶解于水有个过程,吋间过短,产物溶解不充分,但时间过长乂易引起产物结构的破坏和生物活性的丧失,并使生产效率降低,所以,姬松茸的提取时间以3〜

8、4为好呵。1.1.7不同乙醇浓度对提取量的影响用水提法提出多糖后用乙醇沉淀,乙醇的浓度也是需要考虑的重要因索。用乙醇沉淀多糖,有吋不同浓

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