CRISPRCas9基因编辑技术在病毒领域的研究进展解析.pdf

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1、万方数据国匮痘垂堂盘查!Q!!生!!且筮垫鲞筮!塑!!!!坐型i!趔』!!里坐遁yi盟!!臣，Q!!!b堕!!!!：!!!：垫：塑!：!respiratorysyndrome：thestateoftheart[J]．JMolDiagn，2005，7(5)：551-559．[29]GemaG，CampaniniG，RovidaF，eta1．GeneticvariabilityofhumancoronavirusOCA3·，229E-，andNL63一likestrainsandtheirassociationwithlowerrespimtoUtractinfectionsof

2、hospital—izedinfantsandimmunocompromisedpatients[J]．JMedVirol，2006，78(7)：938-949．[30]ChanKH，PoonLL，ChengVC，etal，DetectionofSARSCOro—navimsinpatientswithsuspectedSARS[J]．EmergInfectDis，2004，10(2)：294-299．[31]ChartPK，ToWK，NgKC，eta1．LaboratorydiagnosisofSARS[J]．EmergInfectDis，2004，10(5)：825-83

3、1．[32]CormanVM，MullerMA，CostabelU，eta1．Assaysforlaborato—ryconfirmationofnovelhumancoronavims(hCoV．EMC)jnfec—tions[J]．EumSurveill，2012，17(49)．[33]DrostenC，GuntherS，PreiserW，eta1．Identificationofanovelcoronavirusinpatientswithsevereacuterespiratorysyndrome[J]．NEnglJMed，2003，348(20)：1967-1976

4、．[34]Lux，WhitakerB，SakthivelSK，eta1．Real—timereversetran—sefipfion—PCRassaypanelforMiddleEastrespiratorysyndromecoronavims[J]．JClinMicrobiol，2014，52(1)：67-75．(收稿日期：2016-03-03)(本文编辑：高志勇)CRISPR／Cas9基因编辑技术在病毒领域的研究进展高敏岳路路闰滨【关键词】乙型肝炎病毒；人类免疫缺陷病毒I型；人乳头瘤病毒；疱疹病毒CRISPR作为一项新兴的基因编辑技术，白发现以来，因其简单经济、特异性高的

5、优势，受到了许多研究人员的高度关注。近年来CRISPR／Cas9技术在许多领域上已得到广泛应用，但在病毒领域研究较少，刚刚起步。本综述通过回顾CRISPR技术在病毒领域应用的相关文献，主要针对乙肝病毒、艾滋病毒、人乳头瘤病毒及疱疹病毒的研究进展展开讨论，为国内相关领域的发展提供理论和技术依据。1基因编辑技术发展简介20世纪80年代初，显微注射技术得到了令人瞩目的发展，科学家使用此技术将外源DNA片段成功导入小鼠受精卵原核中，世界第一只转基因小鼠就此诞生。但此方法只能单纯的导入目的基因，并不能对目的基因进行特定的修饰和改造。80年代后期，基于同源重组技术和小鼠胚胎干细胞(ES细

6、胞)的基因打靶技术使科学家们可以根据自身要求对小鼠的任何基因序列进行修饰和加工改造。这为DOI：10．3760／cma．J．issn．1673-4092．2016．05．017基金项目：科技部“重大新药创制”科技重大专项“治疗温病的中药新药研发”(2014ZX09509001)；山东省中医药抗病毒协同创新中心“中医药抗病毒应用基础与关键技术研究及产业化”(XTCX2014)作者单位：250355济南山东中医药大学通讯作者：闫滨，Email：robinyan2002@163．com今后生命科学的研究工作提供了有力的技术支持。但使用该技术构建基因工程动物模型耗时久、花费高，基因修

7、饰的操作是在胚胎干细胞中进行，且限制在小鼠和大鼠中。随后，科学家们发现了两种人工改造过的核酸酶，即锌指核酸酶(zinc—fingernucleases，ZFN)和转录激活因子样效应物核酸酶(transcriptionactivator—likeeffectornucleases，TALEN)，两者皆能识别和结合特定的基因序列，并高效精确剪切和修饰，可应用到除小鼠和大鼠以外的其他生物模型。但其操作复杂、费用较高。近年来，一种被称为规律成簇的间隔短回文重复序列(clusteredregularlyinter