医学毕业论文60coγ射线全脑常规照射后大鼠血脑屏障的电镜观察.doc

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1、XX大学毕业论文60Co照躺大的电镜MS2014年6月25日60Co丫射线全脑常规照射后大鼠血脑屏障的电镜观察【摘要】忖的：观察60Co丫射线全脑常规照射后大鼠血脑屏障（BBB）的超微结构改变。方法：20只SD大鼠随机分为5组，依次为对照组、10Gy组、20Gy组、30Gy组和40Gy组，每组4只。60Co丫射线全脑常规照射，2Gy•次1,5次•周1,照射后16h用澜示踪电镜化学技术观察大鼠BBB超微结构的变化。结果：对照组锄颗粒局限在血管腔内；lOGy组紧密连接处见觸颗粒沉积；20Gy组鋼颗粒弥漫性地分布于神经细胞间隙；30Gy组鋼颗粒进入神经细胞内，并分布于线粒体、内质网等细胞器表而

2、；40Gy组领）颗粒弥漫分布于脑组织细胞间和细胞内，可见毛细血管内皮细胞及神经细胞失去正常形态，结构破坏。结论：全脑常规外照射后大鼠BBB均出现病理改变，且射线具有降低及破坏BBB功能的作用，在全脑放疗期间随照射剂量的变化而呈规律性改变，具有可预测性。【关键词】放射治疗血脑屏障超微结构大鼠血脑屏障（BBB）是血脑之间物质交换的限制系统，在对维持脑内微环境稳定的同吋，它也导致约95%的药物不能有效透过完整的BBB,使得许多对屮枢神经系统疾病有潜在治疗价值的药物不能发挥药理作用［12］。研究发现放射线在治疗脑瘤的同吋亦具有破坏BBB的作用，因此利用放射线开放BBB后进行化疗对改善脑肿瘤预后可

3、能有帮助。国内外对脑部大剂量的局部照射［3］进行了较多研究，但对照射后BBB超微结构变化的研究却很少，因此不可能对脑照射后BBB的改变规律作出客观的评价。为明确全脑常规照射对BBB功能影响的变化规律，本研究对正常SD大鼠进行全脑常规分割照射，通过镰I示踪电镜化学技术观察大鼠BBB超微结构的变化，具体如下。1材料与方法1.1实验动物与分组正常健康成年SD大鼠20只，雌雄不限，体重205〜306g,平均251g（徐州医学院实验动物屮心提供），随机分为5组，即对照组（照射OGy）、10Gy组、20Gy组、30Gy组和40Gy组，每组4只。1.2动物预处理照射大鼠经麻醉后侧卧于治疗床上，经模拟定

4、位后进行全脑外放射治疗，60Co治疗机（上海医用合资仪器厂，FHC50型）源皮距75cm,照射野大小约2cmx2cm,上界位于双眼后眦连线，下界位于双耳后连线，左右露空，垂照，2Gy•次一1,每H—野，每周5次。每次治疗前用0.4%的戊巴比妥钠（25mg・kg—1）腹腔注射麻醉，每次治疗结束后在同一条件下饲养。1.3电镜制作每组在治疗完成后按王爽等［4］电镜制作步骤留取标本，制作超薄切片,在透射电镜（口本口立H600型）下观察与拍照。2.实验结果电镜超微结构表明，对照组高电子密度的辆颗粒仅分布在毛细血管管腔内,附着在毛细血管内壁的表面，毛细血管内皮细胞间紧密连接、基底膜及毛细血管外的组织

5、间隙均未见銅颗粒沉积，毛细血管内皮细胞及脑组织细胞无肿胀（图1）;lOGy组见毛细血管内皮细胞间的紧密连接处鯛颗粒呈线性沉积，但基底膜处及脑纽织间隙未见鋼颗粒沉积，细胞形态结构未见明显界常（图2）；20Gy组屮紧密连接开放，细小的高电子密度鋼颗粒通过毛细血管基底膜进入到脑组织内，分布在神经组织细胞间隙和轴突周围，但未进入脑组织细胞内（图3）,与照射前相比，说明BBB的通透性明显增加，屏障功能遭到破坏；30Gy组毛细血管内、紧密连接、基底膜及脑组织内弥漫性的细小澜颗粒沉积，并见澜颗粒进入组织细胞内部，分布于线粒体、内质网等细胞器的表面，甚至进入部分线粒体内部，沉积于线粒体畴的表面（图4）,

6、部分核孔及核内亦见镰）颗粒沉积，但核内沉积量较核外沉积明显少，染色质边聚，内质网池扩大，血管内皮细胞、脑组织细胞、核膜结构尚完整，形态无明显异常（图5）；40Gy组镰

7、颗粒弥漫分布在毛细血管内皮细胞、基底膜、脑组织细胞间及细胞内，内皮细胞肿大，管腔闭塞（图6）,髓鞘分离，部分毛细血管内皮细胞及神经细胞失去正常形态，结构破坏（图7）,并见髓鞘周囤及内部錮颗粒沉积，呈板层状表现（图8）。3讨论放疗是颅内肿瘤术后最重要的辅助治疗手段，自放射治疗应用于肿瘤治疗以来，预后明显改善。近年來，尽管放射生物和放射物理方面进展很快，但是单纯放疗对脑瘤预后的进一步改善作用却不大，主要原因是由于放射线在治疗肿

8、瘤的同时，不可避免地会对周围正常脑组织造成损伤，特别是随着脑瘤病人牛存期的延长，放射性脑损伤的问题越来越突出，因此不能通过提高照射剂量的方法来延长脑瘤病人的生存期。研究表明，脑肿瘤病人的BBB虽有一定程度的异形性,但从形态学上未见异常［56］,至少在肿瘤边缘BBB相对完整，因此化疗对许多脑瘤的预后影响不大，未显示出优越性。木研究从超微结构上证实了常规放疗后BBB的变化规律，对指导临床放化综合治疗具有参考价值。本实验采用了辆示踪法观察