DB23∕T 2424-2019 马铃薯早疫病检测技术规程.pdf

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1、ICS65.020.01B15DB23黑龙江省地方标准DB23/T2424—2019马铃薯早疫病检测技术规程2019-07-23发布2019-08-22实施黑龙江省市场监督管理局发布DB23/T2424—2019前言本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省农业农村厅提出。本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：黑龙江省农业科学院马铃薯研究所、中国农业大学植物保护学院。本标准主要起草人：胡林双、王晓丹、闵凡祥、高云飞、王文重、杨帅、魏琪、董学志、郭梅、盛万民、白艳菊。IDB23/T2424—2019马铃薯早疫病检测技术规程1范围本标准规定了马铃

2、薯早疫病田间检测和室内检测。本标准适用于马铃薯植株和块茎早疫病检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB7331-2003马铃薯种薯产地检疫规程GB8855新鲜水果和蔬菜的取样方法GB6682分析实验室用水规格和试验方法3田间检测3.1抽样抽样参照GB7331-2003中5.1.1.2规定的方法执行。3.2田间症状鉴别田间病株和薯块症状，以肉眼观察为主(参见附录A)。4室内检测4.1取样方法取样方法参照GB8855中规定执行。4.2实验用水实验用水

3、应符合GB6682的规定。4.3试剂NaClO、盐酸、75%酒精、无菌水、马铃薯葡萄糖琼脂（PDA培养基），所用试剂级别均为分析纯。4.4仪器和器具培养箱、生物显微镜、无菌操作台、载玻片和盖玻片、培养皿、酒精灯、手术刀、灭菌锅等。4.5操作步骤1DB23/T2424—20194.5.1直接镜检若样品发病部位已有霉层存在，可挑取其霉层直接镜检。若无霉层，则按以下步骤进行：将待检叶片用蒸馏水清洗晾干后，放入保湿器皿中，放在25℃培养箱内培养1d～4d后，挑取霉层直接镜检；将待检块茎用自来水清洗后，用1%NaClO溶液表面消毒3min～5min，再用无菌水清洗3次，晾干，将块茎切片或直接放入

4、保湿器皿中，放在25℃培养箱中暗培养3d～5d。挑取霉层直接镜检。4.5.2分离培养后镜检用无菌刀片切取病健交界处的叶片或块茎病组织，面积约为5mm×5mm大小，放入75%的酒精中进行组织表面消毒2min，用无菌水冲洗3次，再用无菌滤纸将叶片表面的水分吸干，放入无菌的PDA培养基上。每个培养基上一般放置3～4片，在25℃下恒温培养。3d～4d后，在无菌条件下挑取病组织周围长出的尖端菌丝，移入PDA培养基进行纯化培养。在25℃光（光照强度大于3000lux，16h）和暗（8h）交替恒温培养4d左右，挑取少量菌丝，镜检。4.6结果判定将压好的玻片放在生物显微镜下观察病原菌形态特征，如果镜下

5、的分生孢子形态符合茄链格孢菌的形态特征，则判定为马铃薯早疫病菌（参见附录B）。2DB23/T2424—2019附　录　A（资料性附录）马铃薯早疫病主要典型症状A.1马铃薯早疫病叶片症状在植株下部叶片或老叶上产生小的、近圆形、褐色至深褐色病斑，病斑可迅速扩大，其上产生黑色同心轮纹和少量黑色霉层。严重时，整个病斑相互连接，但受叶脉限制成三角形或不规则形，最后穿孔，叶片变黄，干枯，甚至脱落。见图A.1。图A.1马铃薯早疫病叶片症状A.2马铃薯早疫病茎部症状叶柄受害多发生于分枝处，病斑褐色，线条形，稍凹陷，扩大后呈灰褐色长椭圆形病斑，有轮纹。见图A.2。3DB23/T2424—2019图A.2

6、马铃薯早疫病茎部症状A.3马铃薯早疫病块茎症状块茎被侵染后，产生暗褐色，稍凹陷，圆形或近圆形病斑，大小不等，有的病斑，直径可达2cm。边缘明显，皮下呈浅褐色、海绵状干腐，深度一般不超过6mm，在老化的病斑上，可以产生裂缝。在贮藏期间病斑可增大，块茎皱缩。见图A.3。图A.3马铃薯早疫病块茎症状4DB23/T2424—2019AA附　录　B（资料性附录）茄链格孢菌Alternariasolani形态特征B.1马铃薯早疫病病原茄链格孢菌形态特征马铃薯早疫病的病原为茄链格孢[Alternariasolani(E.&M.)Sorauer]。茄链格孢菌属于半知菌（Deuteromycota），丝

7、孢纲（Hyphomycetes），丛梗孢目（Moniliales），暗色孢科（Dematiaceae）。分生孢子梗单生或丛生，长不超过110µm，宽6µm～10µm。分生孢子单生，倒棍棒形至长椭圆形，淡金黄褐色至榄褐色，具长喙，表面光滑，9～11个横隔膜，0至数个纵隔膜，150µm～300µm×15µm～19µm。喙长等于或长于孢身，有时有分枝，喙宽2.5µm～5µm。见图B.1。图B.1显微镜下马铃薯早疫病病原Alternariasolani