不同品种小麦愈伤对除草剂的抗性研究.doc

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1、不同品种小麦愈伤对除草剂的抗性研究摘要：以4个小麦品种的幼胚为外植体，采用MS诱导培养基和分化培养基，研究不同基因型间愈伤组织诱导的差异，以及草甘麟浓度对愈伤组织的影响。随草甘麟浓度的增大，小麦幼胚分化率呈曲线变化，且品种间差异较大，矮抗58适宜的筛选浓度4mmol/L,郑麦9023、周麦18应采用浓度为2mmol/L的草甘麟筛选比较适宜;对于郑麦366适宜的筛选浓度为lmmol/Lo关键词：小麦；幼胚；愈伤组织；分化率Researchofdifferentvarietiesofwheatcallusonherbicideresistan

2、ceAbstract：Immatureembryosoffourwheatvarietiesasexplants,usingMSinductionmediumanddifferentimtionmedium,Researchbetweendifferentgenotypesofcallusinductionofthedifferences,1材料与方法1.1材料供试小麦品种为郑麦9023、郑麦366、周18、矮抗58,所有材料均播种于河南农业科学院试验田。1.2培养基诱导愈伤组织培养基：MSD2+3.0%蔗糖+2.0mg/L麦草畏+15.

3、mg/L天门冬酰胺+8g/L琼脂，PH=5.8；愈伤组织筛选培养基：MS基本培养基+不同浓度glyphosate+3.0%蔗糖+8g/L琼脂，PH=5.8；分化培养基：MS基本培养基++2.0mg/LKT+1.0mg/LIAA+3.0%蔗糖+8g/L琼脂,PH=5&生根培养基：1/2MS基本培养基+0.5mg/LNAA+3.0%蔗糖+8g/L琼脂,PH=5&所有培养基均采用常规方法灭菌，glyphosate采用过滤灭菌，在培养基冷却至60左右加入。1.3方法131幼胚培养在小麦开花授粉后14〜18d,以幼胚0.5〜1.0mm大小，半透明装

4、为宜。田间去取整穗，剥掉内外颍壳，籽粒在超净台上用75%乙醇表而消毒30s,无菌水冲洗三次，0.1%的升汞浸泡15min,无菌水冲洗3〜5次。然后用解剖刀取岀幼胚,盾片向上接种于诱导培养基上。暗培养两周后转入筛选培养基继续暗培养，每两周继代一次，三周后转入分化培养基上进彳亍分化培养，每两周继代一次，三周后转入生根培养基上进行生根培养。接种采用盾片向上放置，这样有利于产生愈伤组织，致密愈伤组织诱导率要显著高于盾片向下放置2。筛选培养草甘麟设置4个不同浓度，一个对照，按照浓度不同做4次重复。1.3.2数据统计愈伤组织诱导率二（产生的愈伤组织数

5、/接种幼胚数）X100%；芽分化率二（分化出芽的愈伤数/接种愈伤数）X100%；再生率二（再生出完整植株达的愈伤数/接种愈伤数）X100%。1结果与分析2.1不同小麦品种幼胚愈伤组织的诱导小麦幼胚接种后3d左右开始膨大，在盾片周围逐渐形成愈伤组织，一周基本全部形成愈伤，两周形成较大愈伤组织（图1）。在相同的诱导培养条件下四个不同品种小麦愈伤的诱导率均不相同（表1）,且品种间差异显著。图1周麦18的幼胚愈伤组织表1不同小麦品种幼胚愈伤组织的诱导品种接种胚数（个）愈伤数（个）愈伤诱导率（％）（个）郑麦902381648959.9郑麦36686

6、174586.5周麦1874070695.4矮抗5810509278&32.2草甘麟对小麦幼胚转化效率的影响转入筛选培养基以后，愈伤继续膨大。本实验选用了MS基本培养基和不同浓度的草甘麟。经过三周培养，每个品种中在加入不同浓度草甘麟的培养基上表现出明显差异（图3）。结果显示，对于郑麦9023、周麦18来说，采用浓度为2mmol/L的草甘麟筛选比较适宜;对于郑麦366适宜的筛选浓度为lmmol/L；而矮抗58适宜的筛选浓®4mmol/Lo小麦幼胚愈伤组织生根很容易，在分化培养基上分化出小苗，转至生根培养基后就逐渐生根,形成完整植株，生根率达

7、100%。因此，对于小麦幼胚愈伤组织芽分化率和再生率相同。本实验中所选的四个品种在相同的分化条件下矮抗58的分化再生能力最强，其余三个品种分化能力相差不大。每个品种的愈伤组织随着草甘麟浓度的增大分化率减小。草甘麟浓度（m.mol/L）图2草甘麟浓度对小麦愈伤组织分化的煤响(&)表2筛选剂草甘麟适宜浓度的确定革甘麟浓度四周褐化数（个）褐化死亡率（％）品种（mmol/L）接种块数（个）04012.5郑11364734.6麦21156859.99023312010991.84383797.408433.6郑1159533.3麦21408963.

8、6366314211883.14665989.40481122.9周1893033.7麦2924548.9183705375.741049490.407300矮110411.0抗2161442