柠檬酸铁铵通过活性氧途径影响人丙型肝炎病毒的蛋白翻译.pdf

《柠檬酸铁铵通过活性氧途径影响人丙型肝炎病毒的蛋白翻译.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、2017年1月基础医学与临床January2017第37卷第1期Basic＆ClinicalMedicineVol．37No．1文章编号:1001-6325(2017)01-0001-07研究论文柠檬酸铁铵通过活性氧途径影响人丙型肝炎病毒的蛋白翻译131331*2*冯琼，王强，史云湘，周季平，方旭，庞东卫，刘一萍(1.内蒙古科技大学包头医学院，内蒙古包头014040;2.北京市公安医院，北京100121;3.中国人民解放军疾病预防控制所，北京100071)摘要:目的研究铁对HCVIＲES依赖的病毒蛋白翻译的影响，以及其与

2、细胞ＲOS活性变化的关系。方法以脂质体细胞转染法，将双荧光素酶报告基因表达载体pCI-Ｒluc-HCVIＲES-Fluc转染人肝癌细胞系Huh-7细胞。在0、50和300μmol/L浓度的柠檬酸铁铵(FAC)作用24h后，双荧光素酶报告基因检测系统检测HCVIＲES依赖的病毒蛋白翻译的变化。ＲOS荧光染色方法检测细胞ＲOS活性变化，Westernblot法检测细胞中Nrf2蛋白表达的变化。加入100μmol/L的DPI后，检测300μmol/LFAC实验组中HCV蛋白翻译的变化和细胞ＲOS的变化。结果与对照组相比，FAC

3、增加了Huh-7细胞HCVIＲES依赖的病毒蛋白翻译、增加了ＲOS活性，并且可以引起核转录因子Nrf2表达增加(P＜0.05)。加入ＲOS抑制剂DPI后，可以显著抑制FAC诱导的HCVIＲES依赖的病毒蛋白翻译及Nrf2蛋白的表达(P＜0.05)。结论FAC可以诱导细胞HCVIＲES依赖的病毒蛋白翻译增加，可能与FAC促进Huh-7细胞产生过多的ＲOS有关。关键词:柠檬酸铁铵;丙型肝炎病毒;内部核糖体进入位点;活性氧中图分类号:310.24文献标志码:ADOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2017

4、.01.001EffectofferricammoniumcitrateonＲOS-inducedHCVIＲEStranslation13133FENGQiong，WANGQiang，SHIYun-xiang，ZHOUJi-ping，FANGXu，1*2*PANGDong-wei，LIUYi-ping(1.BaotouMedicalCollege，InnerMongoliaUniversityofScienceandTechnology，Baotou014040;2.BeijingMunicipalPublicSecur

5、ityHospital，BeijingMunicipalPublicSecurityBureau，Beijing100121;3.InstituteofDiseaseControlandPrevention，AcademyofMilitaryMedicalSciences，Beijing100071，China)Abstract:ObjectiveToidentifytheactivityofHCVIＲEStranslationdifferencesandidentifytherelationshipbetweenHCV

6、IＲEStranslationactivityandＲOSindifferentconcentrationsofferricammoniumcitrate(FAC)in-duction．Methods1)ExpressionplasmidpCI-Ｒluc-HCVIＲES-FlucwasconfirmedbyendonucleasedigestionaswellasluciferasetransientexpressioninHuh-7cell;2)Controlledbydual-luciferasereporteras

7、say，thediffer-enttranslationactivityofHCVinternalribosomalentrysite(IＲES)wasexaminedinaconcentrationof50μmol/Land300μmol/LofFACinduction;ＲOSfluorescentstainingmethodwasusedtodetecttheactivityofＲOSinHuh-7cells，Westernblotmethodwasusedtodetecttheproteinexpressionch

8、angesofNrf2inHuh-7cells;3)Onthebasisoftheaboveexperiments，100μmol/LDPIwasaddedin300μmol/LFACexperimental收稿日期:2015-10-27修回日期:2016-05-04基金项目:国家自然科学基金(81200298，81