以正构液蜡为原料发酵生产柠檬酸和碱性蛋白酶.pdf

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1、DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.1980.06.019气以正构液蜡为原料发酵生产柠檬酸和碱性蛋白酶一、柠檬酸、、、中尾秋山Jl渊铃木等首先介绍了由正构液蜡发酵生产柠檬酸的技术以及它的。丈历史背景和研究经过所以本文偏重于介绍今后的研究动向和以新工艺开发为目的的研,,究过程中遇到的一些新的有趣的问题例如酵母代谢过程中的变化即所谓酵每发酵转。化现象和有关有机酸代谢方面提出的一些新的见解`、1非糖类物质为碳源生成的有机酸。非糖类物质为碳源的有机酸生产工艺研究已有很多的报道各种微生物以正构烷烃为主的气态碳氢化合物、甲醇、乙醇、醋酸等作为碳源生成各种有机酸。全世界每年需要

2、,,的柠檬酸约10万吨以往都用黑曲霉由废糖蜜原料制造为开发经济的生产方法正在。努力研究、2采用酵母菌由正构液蜡发酵生产柠檬酸·柠檬酸可由各种非糖类物质而生成,从工业生产方法的发展观点,提出了以正构液,。,蜡为碳源时采用酵母菌特别是假丝酵母属的各种菌一般酵母可以同时生成柠檬酸。,。和副产物异柠檬酸为了提高柠檬酸收得率开展了抑制异柠檬酸副产物生成的研究anaoea,、田渊等用解脂假丝酵母(Cdidliplyti)中西服部等用涎沫假丝酵每andazeylanoes,anaerea(Cidid)古川用柠檬酸假丝酵母(Cdiditi)研究发酵生。产的最适培养条件(1)培养基和培养条件(a)碳链的长短

3、无论是奇数的或偶数的正构液蜡都能生成柠檬酸,并且收得率。,,。16,、:6,,。几乎相同当用解脂假丝酵每时以C一C特别是C和C涎沫假丝酵母用C,8,,:,:。一C柠檬酸假丝酵母用C一C的正构液蜡适于生成柠檬酸`,(b)氮源浓度一般有机酸发酵氮源浓度能支配酸的生成本发酵最适浓度为0.3一0.4%oc()磷酸盐浓度霉菌柠檬酸发酵中培养基中磷酸盐的浓度是提高柠檬酸得率的。..1习又一“一个重要因素福田等认为培养基中磷和碳氢化合物的重量比(P/C)06一0]。,时积累柠檬酸的量最高因此培养基中的磷酸浓度控制在最低范闹内正好是菌的最大,。生长量所需要的浓度此时正构液蜡转化成柠檬酸的效率最好,,(d)

4、添加营养物质的浓度解脂假丝酵母在硫胺素存在时能够显著地促进生长。2所以柠檬酸发酵中所用培养基需要添加适量的硫胺素或者添加其它的类似物(e)铁离子浓度将柠檬酸转化成异柠檬酸的催化反应酶乌头酸酶,在它的分子。,中含有铁由霉菌废糖蜜柠檬酸发酵中很清楚培养基中的铁离子浓度几乎可以决定柠,,。檬酸的生成率田渊等研究了培养基中铁离子浓度的影响铁离子浓度二IOppm的范围内,;但培养基中铁离子含量降低,异柠檬柠檬酸和异柠檬酸的生成量几乎是相同的,。酸的生成就可抑制而柠檬酸的得率就可提高.,,,,2(f)其它的添加物当培养基中添加硼砂钻氧化铅聚乙醇4一二硝基苯.,,,,,酚26一二梭毗咤哇琳酸杂环化合物等

5、时柠檬酸的得率可以大大提高而作用。机理至今尚不清楚,。(g)温度解脂假丝酵每26℃涎沫假丝酵母和柠檬酸假丝酵每30℃为最适温度(h)PH和中和剂在发酵生产过程中发酵醒液的管理是十分重要的,关于柠檬酸,,,发酵的重要性已由田渊指出解脂假丝酵母延沫假丝酵每柠檬酸假丝酵每最适的..。。pH,,都在。5一65在酸性条件下培养要产生聚乙醇altJ产物中和剂采用碳酸钙氢,。,,,J氧化钠氨水等一般来讲有机酸发酵有过剩的氮源存在时菌体增殖就旺盛而酸。,的生成量减少如果限制培养基中的磷酸浓度用氨水作中和剂那就可以提高柠檬酸的。,,积累量生产作为洗涤剂用的柠檬酸钠的时候若用氢氧化俐作中和剂发酵液中就可。以积

6、累柠檬酸钠(2)使用变异菌株,。,酵每利用正构液蜡发酵生产柠檬酸时常有多量的异柠檬酸副产物已经讲过采用,,由自然界中分离出的酵母菌株在工业生产中要寻找适宜的培养基和培养条件不生,。,成异柠檬酸副产物而柠檬酸的积累量要高在培养解脂假丝酵母对在培养基札寿要,,添加已知的作为乌头酸酶的抑制剂氟醋酸就可抑制副产物异柠檬酸的性成而。,柠檬酸的产量大大增加秋山诱导出乌头酸酶活性低的变异株被认为是工亚生产上的.:。优良菌株`具有以下特征(1)在以柠檬酸为唯一碳源的培养基不能生长(2)对氟醋酸,。敏感性很大在含有氟醋酸的培养基上生长不良以解脂假丝酵母ATCC20114作为出,,。发菌株采用一般的诱变处理方

7、法多数不同化柠檬酸和对氟醋酸有敏感性研究其柠,以檬酸和异柠檬酸生成能力的结呆表明不同化柠檬酸的K一20菌株和对氟醋酸敏感的。,,s一拐为优良菌株出发菌株具有很强的乌头酸酶活性积累柠檬酸约60毫彭毫升。,异柠檬酸约切毫克/毫升变异菌株S一2的乌头酸酶活性约降低到亲株的1/100儿乎,,。不产生异柠檬酸积累柠檬酸量110毫克/毫升对消耗的正构液蜡计收率为1朽%、3关于醉母发酵柠橄酸的发酵过程变化,为了开发用假丝酵母属酵母由正

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