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1、,,一、一血病母细胞株K562结果表明19E的10一种快速分离人外周血中裸淋巴细胞裸细胞亚群具有明显的ADCC和自然杀伤的方法,ADCC效功能其能比未组分淋巴细胞高5.。而馆+、E+鉴于人类裸淋巴细胞迄今未见特异性表倍自然杀伤能力高25倍细胞`。面标,B和r细胞的负选择法可志故用去除亚群的细胞毒活性全部丧失。,加以分离大多数学者采用两步法分离技据此作者认为双花环技术可作为分离,,术即用尼龙丝吸附或抗工g柱层析法去除B裸细胞的常规方法全过程可在两小时内完,,,。细胞继用花环形成试验借密度梯度离心成而用免疫吸附柱分离要六小时以上此,。,,去除T细胞这种方法麻烦费时本文介绍外本法可用以制
2、备大量的裸细胞群且可。,一种简单的一步法双花环分离技术得到高回收率和表型纯的裸细胞群并具良:eo一aue。具体方法如下用FillHypq分好的ADCC和NK活性故本法可用以进一,从人外周血中分离ADCC与NK的效应细胞群以及了解层液借密度梯度离心法步鉴定。。单个核细胞用含10%小牛血清的MEM液T和B细胞前体的分化6。:配成10X10/毫升细胞浓度在有些实验〔OzerHetalCellImmunol45,,:2)33,中先用贴壁法除去能粘附塑料瓶的细胞(41979(英文)王志勤摘,但粘附细胞的存在并不影响裸细胞的产量章谷生校〕和细胞毒活性。将所得细胞群与经神经氨酸SRBC作E花环形
3、成试,继将花101克罗恩氏病的免疫障碍酶处理的验,ron环沉淀物轻轻重悬后加入特异性兔抗人19致前不久许多研究者把克罗恩(Ch),OSRBC4c,5分钟,敏的放置低速离心将氏病列为小肠的局限性损害(节段性回肠c一a。上述联合花环悬液用iFollrlypque分层炎)现在认为本病可以侵犯胃肠道的任何,9`。ason:液作密度梯度离心此时形成1和E花环部位根据Wt的资料50%~60%的,,;10%一17%在的细胞沉于管底而裸细胞留在分层液的界病例受损过程局限在小肠,,,;。面收集界面细胞经洗涤与重悬后分别结肠17%~40%同时侵犯结肠和小肠。作细胞毒性试验并测定纯度在最近的10一15年
4、中所获得的材料证:c,结果表明①用Fioll纯化的单个核细明免疫因素在克罗恩氏病的发生上起重了57x10“、胞(细胞总数为0和0)作过五次要作用该病患者表现出结核菌素反应和二,;双花环负选择分离裸细胞回收率平均为硝基氯苯反应低下在淋巴细胞对植物血球,,,5土3%裸细胞呈小的单核形态它与T和凝集素的胚细胞转化反应中T一淋巴细胞B细胞无形态学_L的区别,活性降低。:用本法所得裸细已经证明周围血液细胞在结肠,,4,,胞群90~95%为E花环阴性仅%细胞壁提取物的环境中其游走性受抑制此与。。与抗19致敏的SRBC形成花环用更敏感的疾病的活动程度有关一系列研究者发现血,。eeearnu荧光分
5、类技术测定时裸细胞中有10%为清中IgA的浓度增加Wk和Jm发519阳性,:用异种抗人T细胞A9抗血清检现对治疗有良好反应的患者与没有进行保,。,,测时5%细胞为阳性总之85%以上的裸守治疗的患者相比免疫球蛋白表现出相当。。细胞无成熟T和B细胞的表面标志②对比高的水平该病患者的血清中存在抗大肠抗,。用上法分离的裸细胞与未组分以及组分的T体此抗体的量决定于疾病的活动程度近、:和B细胞的细胞毒活力ADCC试验使用抗来许多研究者指出由微生物杭原交叉反应,,体包裹的同种细胞而自然杀伤试验采用白形成的免疫在克罗恩氏病的发生上起了重333一一
