鸽Ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗基础种子代次鉴定试验初报.pdf

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1、·４０·《上海畜牧兽医通讯》２０１７年第２期鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）灭活疫苗基础种子代次鉴定试验初报张俊平１，２１１１１，２１１，２＊张佩华周宗清蒋凤英赵本进杨惠萍倪建平（１上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海２０１１０６２上海佳牧生物制品有限公司上海２０１１０６）【摘要】为了确定鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）灭活疫苗基础种子批的代次。本研究将鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）在ＳＰＦ鸡胚上连续传至１５代，初步确定第１０～１５代为基础种子批，对１０～１５代进行了无菌检验、病毒含量测定、血清学特异性试验。试验结果表明：１０～１５代鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）无菌，各代次病毒含量稳定（１０７．３７．７～

2、１０ＥＬＤ５０／０．１ｍＬ），血清学特异性未发生改变。因此，确定鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）１０～１５代为鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）灭活疫苗毒种的基础种子批。关键词：鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗；Ｓ－１株；基础种子；病毒含量；血清学特性DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2017.02.015鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｐｉｇｅｏｎｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｕｓ－Ⅰ，的预防作用，但鸽Ⅰ型副黏病毒病仍时有发生，常〔９～１０〕ＰＰＭＶ－Ⅰ）是禽副黏病毒的一种。禽副黏病毒属出现免疫失败，目前也没有针对此病的药。为副黏病毒亚科，包括９个血清型（ＰＭＶ－Ⅰ～ＰＭＶ－了有效预防ＰＰＭＶ病，本实

3、验室开展了鸽Ⅰ型副黏Ⅸ）。禽Ⅰ型副黏病毒只有１个血清型，其宿主范病毒（Ｓ－１株）灭活疫苗的研制，其中必须确定疫苗〔１〕围广，包括家禽、野禽和观赏鸟等。该病毒是鸡毒株的基础种子和生产种子的代次。本文按照兽新城疫病毒（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＮＤＶ）的一变用生物制品的研究指导原则，通过试验确定了鸽Ⅰ〔２〕异株，它不同于典型的ＮＤＶ，与ＮＤＶ是２个不型副黏病毒（Ｓ－１株）灭活疫苗的基础种子的代次范同宿主的适应株，既有共性，又有个性，二者都能围，为疫苗研制提供了依据。凝集鸡、鸽的红细胞，致鸡胚全身性出血病变及鸽１材料与方法感染致病，但鸽适应株仅对鸽致病而不引起鸡发１．１材料

4、〔３〕病。ＰＰＭＶ－Ⅰ具有ＮＤＶ相似的特性，病毒表１．１．１病毒：鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）病毒液Ｅ１０面的血凝素和神经氨酸酶蛋白（ＨＮ）能凝集鸡和～Ｅ１５代，由上海市农业科学院畜牧兽医研究所、上某些哺乳动物红细胞，这种凝集作用可被特异性海佳牧生物制品有限公司制备保存。血清所抑制。１．１．２ＳＰＦ鸡胚：北京梅里亚－维通实验动物技鸽Ⅰ型副黏病毒病（俗称鸽瘟）是由ＰＰＭＶ－Ⅰ术有限公司提供ＳＰＦ种蛋，由本实验室孵化至所需引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，是危害〔４〕日龄鸡胚。养鸽业的主要疫病之一。该病于１９８１年首先在苏丹和埃及的信鸽中发现，随后迅速传播到欧洲、１．１．３参考血清：抗

5、鸡ＮＤＶ阳性血清、ＥＤＳ７６Ｖ美国、加拿大等地〔２，５～６〕，到１９８５年已传播到亚洲。阳性血清，均购自中国兽医药品监察所；ＡＩＶ－Ｈ５、在１９８６年前后，我国的鸽群中也发现了该病〔７〕，现ＡＩＶ－Ｈ９、ＡＩＶ－Ｈ７阳性血清，购自哈尔滨兽医研流行于全国各省市〔８〕。近年来，随着人民生活水平究所。的不断提高，我国肉鸽养殖业已得到迅猛发展，随１．１．４１％红细胞悬液：取ＳＰＦ青年鸡血液，按常〔１１〕着养鸽业的兴起，特别是近年来集约化、工厂化肉规方法洗涤制备。鸽养殖业的蓬勃发展，我国有些地区发生鸽Ⅰ型副１．２方法黏病毒病流行，且日趋严重，成为危害养鸽业发展１．２．１无菌检验：按常规方法将鸽Ⅰ

6、型副黏病毒的重要疫病之一，给养鸽业造成巨大的经济损失。〔１１〕（Ｓ－１株）病毒液Ｅ１０～Ｅ１５代进行无菌检验。我国目前控制鸽Ⅰ型副黏病毒病多用鸡新城疫疫１．２．２病毒含量ＥＬＤ５０的测定：将鸡胚液用灭菌苗，如Ⅰ系、Ⅳ系、Ｃｌｏｎｅ３０，在一些鸽场起到了一定生理盐水作１０倍系列稀释，取１０－６、１０－７、１０－８３　　＊为通信作者个稀释度，每个稀释度经尿囊腔内接种１０日龄ＳＰＦ《上海畜牧兽医通讯》２０１７年第２期·４１·鸡胚，每个稀释度接种５枚，０．１ｍＬ／胚，置３６～Ｅ１０～Ｅ１５代病毒液均具有血凝性，凝集价在（７～３７℃继续孵育，观察至１２０ｈ，记录鸡胚死亡情况，１０）ｌｏｇ２，各代

7、次间血凝价（ＨＡ）差异不显著，具体检死亡胎儿有明显病痕，同一稀释度的死胚胚液等量验结果见表３。混合，测定ＨＡ（按《兽药典》附录２８页进行），ＨＡ≥表３鸽Ⅰ型副黏病毒（Ｓ－１株）Ｅ１０～Ｅ１５代病毒液的血凝１∶６４认为感染，计算ＥＬＤ５０。（ＨＡ）试验结果毒种代次Ｅ１０Ｅ１１Ｅ１２Ｅ１３Ｅ１４Ｅ１５１．２．３特异性鉴定：（１）血凝（ＨＡ）试验。应用β－血凝效价（ｌｏｇ２）８９７８９８微量法，对Ｅ１０～Ｅ１５代病毒液进行血凝试验，检测病毒液血凝效价