实验六 实验七 维生素C的定量测定-2,6-二氯酚靛酚法.ppt

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1、实验七维生素C的定量测定-2，6-二氯酚靛酚法一、实验目的二、实验原理三、器材仪器和主要试剂四、实验操作五、思考题一、实验目的了解维生素C的基本特性、功能常见食品维生素含量从食品原料等提取维生素C、脱色、2,6-二氯酚靛酚钠(蓝色)滴定、计算维生素C（抗坏血酸）：酸性己糖衍生物，一种不饱和的多羟基化合物，以内酯形式存在。还原型氧化型性质：水溶液呈酸性具有还原性，能放出2个氢原子而成为氧化型，构成氧化还原体系，维生素C作为递氢体参与体内的氧化还原反应。功能：1）参与体内的氧化还原反应2）解毒作用3）促进胶原蛋白和粘多糖合成，参与细胞间质生成----促进伤口愈合，增加血管致密性-----坏

2、血病。4）促进铁的吸收，作为治疗贫血的辅助药物5）防治感冒、肿瘤、抗癌等。二、实验原理染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性：1）氧化还原状态：氧化态为深蓝色，还原态变为无色；2）介质的酸度：碱性溶液中呈深蓝色，酸性介质中呈浅红色。蓝色的碱性染料标准液，滴定含维生素C的酸性浸出液，染料被还原为无色。滴定终点时，多余染料在酸性介质中表现为浅红色，由染料用量计算样品中还原型维生素C的含量。当维生素C全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。VC还原型脱氢VC氧化型2,6-二氯酚靛酚氧化型(酸性溶液中,呈玫瑰色)2,6-二氯酚靛酚还原型(无色)三、器材仪器和主要试剂偏磷酸：

3、2%溶液(W/V)*,盐酸：2%溶液(W/V)抗坏血酸标准溶液(0.2mg/ml)：称取50mg(准确至0.1mg)抗坏血酸，溶于浸提剂中并稀至250ml。现配现用。2,6－二氯靛酚(2,6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液：称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中，然后称取2,6－二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250ml,过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。四、实验操作1、提取:桔子肉10克(西红柿、猕猴桃、枣5克)于研钵加2%HCl约10ml充分研磨提取液通过两层纱布滤入50ml容量瓶2%HCl定容到50ml或100ml。

4、2、脱色:干燥锥形瓶（≧150ml）加高岭土一匙(用于吸附生物样品中的色素)加入定容液充分振摇（约10分钟）静置上清液滤纸过滤得脱色滤液。3、滴定:1）样品滴定：取三角烧瓶两只，各加脱色滤液10ml，用2,6-二氯酚靛酚钠(蓝色)滴定至出现微红色并保持5秒钟不褪色为止，记下二份样品滴定所用的染液毫升数（滴定过程宜迅速，不超过2分钟），取其平均值----VA；2）空白滴定用10ml2%HCl代替脱色滤液，记下滴定所用的染液毫升数------VB；计算维生素Ｃ（mg/100g）样品＝（VA-VB）SV100/WD式中：VA：滴定样品用去2,6-二氯酚靛酚钠的平均ml数VB

5、：滴定空白用去2,6-二氯酚靛酚钠的ml数S：每毫升2,6-二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素Ｃ的mg数0.088mg/mlV：样品提取液总毫升（定容后的ml数，50或100ml）D：滴定时所取的样品提取液ml数(10ml)W：样品的重量（g）五、思考题1、指出本实验采用的定量测定维生素C的方法有何优缺点？2、简述维生素C的生理意义。