番茄红素的提取.ppt

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1、天然产物化学生物技术及应用专业实验13番茄酱中提取番茄红素实验目的掌握色素提取方法薄层层析分离方法及薄层色谱初步定性方法。了解β-胡萝卜素与番茄红素性质的差别。β-胡萝卜素和番茄红素分子中的碳骨架是由8个异戊二烯单位连接而成的,它们是四萜类化合物。它们的分子中都有一个较长的π-π共轭体系,能吸收不同波长的可见光,因而,它们都呈现一定的颜色β-胡萝卜素是黄色物质,番茄红素是红色物质,所以,又把它们叫做多烯色素。β-胡萝卜素(β--carotene)番茄红素(Lycopene)胡萝卜素是最早发现的一个多烯色素。后来,又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的色素,于是就把这类物质叫做胡萝卜色素类化合

2、物,或者叫做类胡萝卜素。这类化合物大都难溶于水,易溶于弱极性或非极性的有机溶剂,因此又把这类物质叫做脂溶性色素。胡萝卜素广泛存在于植物的叶、花、果实中,尤以胡萝卜中含量最高。胡萝卜素有α、β、γ三种异构体,在生物体中以β-异构体含量最多,生理活性最强。在动物体内,胡萝卜素在酶的作用下可转化为维生素A,因此,胡萝卜素又被叫做维生素A原。番茄红素是胡萝卜素的开链异物体。在成熟的红色植物果实如番茄、西瓜、胡萝卜、草莓等中含量最高,其中含量最多的是番茄。番茄红素是一种优越的天然色素和生物抗氧化剂,预防前列腺癌、乳腺癌和消化道(结肠、直肠与胃)癌的发生在预防心血管疾病、动脉硬化等各种与衰老有关的疾病

3、及增强机体免疫力方面具有重要作用。番茄红素作为新型保健食品、食品添加剂、化妆品和药品具有广阔的市场前景。根据β-胡萝卜素和番茄红素的性质,可利用石油醚、乙酸乙酯等弱极性溶剂将它们从植物材料中浸提出来。根据它们对吸附剂吸附能力的差异,用柱色谱进行分离,用薄层色谱检测分离效果。方法原理番茄中含有番茄红素和少量的β-胡萝卜素,二者均属于类胡萝卜素。类胡萝卜素为多烯类色素,不溶于水而溶于脂溶性有机溶剂。本实验先用乙醇将番茄中的水脱去根据番茄红素与β-胡萝卜素极性的差别,用柱层析可以将它们分离。分离效果可以用薄层层析进行检验。主要实验仪器及材料新鲜番茄(或番茄酱)。95%乙醇,石油醚(60℃~90℃

4、),硅胶G,饱和氯化钠溶液,无水硫酸钠。分液漏斗(150mL),蒸馏瓶(50mL),普通蒸馏装置,硅胶薄层板,量筒,烧杯,试管,层析缸。1、原料处理与色素提取称取新鲜番茄浆3~4g于50mL圆底烧瓶中,加95%乙醇10mL,摇匀,装上回流冷凝管在水浴上加热回流5min,冷却后过滤/趁热稠滤将滤纸和滤渣移回原烧瓶中,用10mL石油醚(60~90℃)水浴上加热回流5min冷却过滤,将2次滤液合并入同一锥形瓶中滤液倒入分液漏斗中,加5mL饱和氯化钠溶液(饱和食盐水)(有利分层),振摇,静止分层。分出橙黄色有机相使其流经一个在颈部塞有疏松棉花且在棉花上铺一层1cm厚的无水硫酸钠的三角漏斗,以除去微

5、量水分。得提取物薄层层析在硅胶G铺成的薄板上距离底边约1cm处,分别用毛细管点上2个样品,点样时毛细管只要轻轻接触板面即可,切不可划破硅胶板。样品之间的距离为1~1.5cm。将此板放入样层析缸中,盖上盖子。切勿让展开剂浸没样品斑点。展开剂:9:1石油醚-丙酮待溶剂展开至10cm左右时,取出层析板。因斑点会氧化而迅速消失,故要用铅笔立即圈出。计算不同样品的Rf值,比较不同样品Rf值大小的原因以及分离效果。记录相关数据实验数据参考在本实验条件下,薄层检测结果为:β-胡萝卜素,黄色,Rf值为0.89;番茄红素,深红色,Rf值为0.84。实验思考题1)在类胡萝卜素的薄层色谱检测中,你究竟观察到了几

6、个斑点?它们的Rf值各是多少?如实记录实验现象,并对实验现象做出解释。2)薄层层析的操作要点是什么?3)根据本实验结果,试提出一个从植物材料中提取、分离、鉴定植物色素的一般流程。

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