细菌基本检验技术(二).ppt

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1、实验一细菌检验基本技术(二)目的掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。熟悉接种细菌工具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领。【器材】接种工具接种环与接种针【标本】琼脂平板:腐生葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、铜绿假单胞菌斜面:大肠埃希菌牛肉膏汤:铜绿假单胞菌,表皮葡萄球菌半固体:大肠埃希菌、表皮葡萄球菌【操作】1.分区划线分离法(用于细菌标本的分离纯化。)五段分区法孵育后情况单菌落(clone)菌苔(lawn)光滑型菌落粗糙型菌落菌落的描述细菌的菌落特征:菌落大小(<1mm,小;1m<<3mm,中等;>3mm,大)形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)高度(突起、

2、扁平或凹陷)边缘(整齐、波形、锯齿状、卷发状等)表面(光滑、粗糙等)湿润度(干燥、湿润等)透明度(不透明、半透明、透明等)颜色(红色、灰白色、黑色、绿色、黄色或无色等)溶血性(α溶血、β溶血或γ溶血)特殊气味(2)琼脂斜面接种法主要用于单个菌落的纯培养及保存菌种,也可用于某些生化鉴定试验的接种。斜面培养基斜面培养基接种后菌落生长示意图菌苔(lawn)(3)穿刺接种法用于半固体培养基或KIA、明胶等具有高层的培养基接种。半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。动力阳性动力阴性(4)液体接种法用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。沉淀生长混浊生长表面生长【

3、注意事项】接种细菌时不要说话,严格无菌操作;接种前要灼烧接种环, 灼烧后接种环要冷却;划线时用腕力,不要使接种环嵌入琼脂;分区划线接种时各个分区要分明;接种完后在培养基底部贴上标签。

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