专题八 第2讲.ppt

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1、第2讲　酶的应用和生物技术在其他方面的应用一、酶的应用1.酶在食品制造和洗涤等方面的应用：(1)影响果汁产量的物质及处理方法。①影响果汁产量的物质——_______和_____。纤维素果胶②处理方法——酶解法。常用的酶及其作用特点：组　成作　用果胶酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶________________________________纤维素酶____、____、___________纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶催化果胶分解为可溶性半乳糖醛酸(2)加酶洗衣粉——常用酶制剂的种类及洗涤原理。①蛋白酶：蛋白质_______

2、+小分子肽。②脂肪酶：脂肪_____+_______。③淀粉酶：淀粉_______。④纤维素酶：纤维素葡萄糖。氨基酸甘油脂肪酸麦芽糖2.制备和应用固定化酶与固定化细胞：(1)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较：直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种类一种或几种一种一系列酶常用方法直接使用包埋法、化学结合法、物理吸附法_______包埋法直接使用酶固定化酶固定化细胞优点效率高、耗能低、无污染_______________成本低、易操作，可催化一系列化学反应缺点环境因素影响大，酶难以回收利用不利于催化一系列化学反应反应物与细胞内的酶不容易接触，催化效

3、率下降可回收反复使用(2)制备固定化酵母细胞的注意事项：①酵母细胞的活化。a.活化时间一般需要________。b.活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器。1h左右②海藻酸钠的浓度。a.浓度过高，将很难形成凝胶珠。b.浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目___，影响实验效果。③刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液(饱和硼酸-氯化钙溶液)中浸泡30min左右，以便形成稳定的结构。④检验凝胶珠的质量。a.用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成

4、功。b.在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。少二、植物组织培养1.植物组织培养：生长素植物细胞的全能性愈伤组织2.植物组织培养和花药离体培养的区别：(1)选材不同：植物组织培养选择___细胞，而花药离体培养则选择_____细胞。(2)生殖方式不同：植物组织培养为_____生殖，而花药离体培养为_____生殖。体生殖无性有性三、DNA和蛋白质技术1.PCR扩增DNA片段：(1)原理：________。(2)条件：____________________。(3)场所：体外PCR扩增仪。(4)方向：DNA聚合酶

5、不能从头开始合成DNA，而只能从________________，因此，DNA复制需要_____。DNA的合成方向总是从___________________延伸。DNA复制模板、原料、酶、ATP3′端延伸DNA链引物子链的5′端向3′端(5)过程：a._____：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，如下图：变性b._____：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图：复性c._____：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图：

6、延伸2.血红蛋白的提取和分离：(1)凝胶色谱法的原理：相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动途径从_____________向下移动从_________________向下移动运动路程__________移动速度__________洗脱次序先__________________后_________________凝胶颗粒间隙凝胶颗粒内部空隙较短较长较快较慢从凝胶柱洗脱出来从凝胶柱洗脱出来(2)实验操作程序：生理盐水洗涤去除杂蛋白血红蛋白的释放加甲苯分离血红蛋白溶液甲苯层血红蛋白的水溶液层透析去除相对分子质

7、量较小的杂质四、DNA的粗提取与鉴定1.材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。2.破碎细胞：(1)动物的红细胞，_____破裂。(2)植物细胞：加入_____________后研磨。吸水洗涤剂、食盐3.除去杂质的方法：方法一：利用DNA在不同浓度的_________中溶解度的不同，通过调节_________的浓度除去溶于和不溶于_________中的杂质。方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10min～15min，嫩肉粉中的___________能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。方法三：利用DNA对_____的耐受

8、性，将滤液放在60℃～75℃的恒温水浴箱中保温10min～15min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。NaCl溶液NaCl溶液Na