动物细胞工程.ppt

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1、动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体(基础)一动物细胞培养的概念动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。二动物细胞培养的过程1为什么选用幼龄动物？2为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎么分散？3用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要成分是什么？用胃蛋白酶行吗？思考因为动物细胞增值能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增值。

2、从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理1.在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。2.动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。相关概念细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。（要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。）相关概念接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。二动物细胞培养的过程原代培养：

3、将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞，配制成一定浓度的悬浮液，放入培养瓶中在培养箱中培养的过程。通常把动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养：培养瓶中的细胞越来越多，用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成悬浮液，分瓶培养的过程。即原代培养后再处理后的后续培养。相关概念胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞40、50代细胞原代培养传代培养无限传代相关概念胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞40、50代细胞原代培养传代培养细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老

4、死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。无限传代（细胞株）（细胞系）取的组织、器官细胞悬浮液酶贴满瓶壁的细胞单个细胞加入液动物胚胎或幼龄动物胰蛋白培养接触抑制归纳过程出现现象剪碎遗传物质未改变10代细胞培养加液40—50代细胞(细胞株)无限传代（细胞系）传代培养胰蛋白加酶遗传物

5、质已改变原代培养讨论1、胰蛋白酶处理细胞会把细胞消化掉吗？3、动物细胞培养能否像植物组织培养那样获得完整个体？2、为什么使用冷冻保存的细胞是10代以内的细胞？4、体外培养的细胞需要哪些物质和环境条件？1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH36.5度左右,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）保证细胞顺利的生长增殖三动物细胞培养的条件大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）

6、获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据二动物细胞培养的条件五植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的细胞培养基特有成分、植物激素葡萄糖、培养结果植物体培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得全能性增殖蔗糖动物血清细胞株、细胞系细胞,某些蛋白质下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。（2）

7、容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用酶处理，这样做的目的是。动物胚胎或幼龄动物剪碎胰蛋白使细胞分散开来，与培养液充分接触，便于培养（3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有________________等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞停止分裂增值，这是培养到第代，这时的培养称为__。（4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用处理，然后配置成，再分装。葡萄糖、动物血清10原代培养胰蛋白酶细胞悬浮液再见