2019高考生物三轮冲刺大题提分大题精做13基因工程含解析.docx

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1、基因工程精选大题例：（2018全国卷II)某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证______

2、_________，也是为了保证__________________。（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________（填“mR

3、NA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。【答案】（1）E1和E4甲的完整甲与载体正确连接（2）转录翻译（3）细胞核去核卵母细胞（4）核DNA【解析】（1）要保证目的基因在受体细胞中能够正确表达，目的基因的首端应有启动子，尾端应有终止子。甲是将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5ˊ末端而获得的L1-GFP融合基因，据此结合题意并分析图示可知：该团队在将甲插入质粒P0时，如果用E2或E3，则目的基因不完整，而使用E1和E4这两种限制酶进行酶切保证了甲的完整，而且也保证了甲与载体正确连接，因此，使用的

4、两种限制酶，是E1和E4。（2）构建的真核表达载体P1中含有GFP基因，而GFP基因的表达产物“某种荧光蛋白（GFP）”在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光。若在导入P1的牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达。基因的表达过程包括转录和翻译。（3）若要获得含有甲的牛，可采用核移植技术，即将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中获得重组细胞，并将该重组细胞在体外培养成重组胚胎，再经过胚胎移植等获得含有甲的牛。（4）PCR是多聚酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的

5、核酸合成技术。若利用PCR方法检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，则应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。模拟精做1．（2018届黑龙江省普通高等学校招生全国统一考试仿真模拟（十)）马铃薯含有丰富的淀粉、氨基酸、多种维生素和无机盐，是种植广泛的农作物。侵染病毒后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请回答下列问题：（1）利用马铃薯的茎尖进行离体培养可以获得脱毒苗，原因在于____________________，该过程依据的原理是______________________

6、___________。（2）为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如图所示：①构建基因表达载体过程中需要用__________（酶）处理。目的基因转录过程中，__________能使转录在所需要的地方停止下来。②将目的基因导入马铃薯细胞使用了__________法，要用__________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。③目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基

7、因的检测方法是____________________。（3）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低病毒的__________基因频率的增长速率。【答案】（1）茎尖病毒极少甚至无病毒（植物）细胞具有全能性（2）①限制酶（或限制性核酸内切酶）和DNA连接酶终止子②农杆菌转化Ca2+③DNA分子杂交技术（3）抗性【解析】（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，可以用来培养脱毒苗，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。（2）①构建基因表达载体，需要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，基因表达载体中

8、的终止子使转录在所需要的地方停止下来。②将外源基因导入植物体内用农杆菌转化法，用Ca2+处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，使外源基因容易导入。③DNA上是否插入了目的基因的检测方法是DNA分子杂交技术。（3）转基因作物与非转基因作物混合播种，可降低抗性作物对害虫的选择性，使害虫种群中的抗性基因频率增长率减慢。2．（2019届河南省