现代分析技术预习教案.docx

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1、现代分析技术预习教案上海师施大学化学糸分析化学教研宣2008-4-6实验一紫外可见吸收曲线的测绘及维生素B12的含量测定3实验二红外光谱和拉曼光谱综合实验5实验三红外光谱和拉曼光谱综合实验10实验四核磁共振(NMR)演示实验12实验五液相色谱柱效能的测定18实验六荧光分光光度法测定氨肽碘针剂屮色氨酸的含量20实验一紫外可见吸收曲线的测绘及维生素B12的含量测定一、目的：掌握紫外一可见分光光度计的原理和操作。熟悉测绘吸收曲线的般方法。比较自动扫描型仪器与手工绘制吸收曲线的差别。掌握两种测定含量的方法。二、原理：维牛素BI2是含Co的有机物，深红色。可以用其水溶液作测量液

2、。用为配置其水溶液相同的溶剂一本实验为水，作为参比溶液。测不同浓度下的吸光度A对C作图，得吸收曲线。也可配置好溶液后在白动扫描的仪器上自动绘制出吸收曲线。山吸收曲线可得到®2三个吸收峰峰位。361nm的吸收峰干扰因素少，可依朗伯一比尔定律A=ECL以比较法，通过测量待测液及标准溶液的吸光度。计算得到样品含量，也可以按约典规定以361±lnm处吸光系数值(207)计算得到含量。三、仪器药品：紫外——可见分光光度计；比色皿VBI2标准溶液VBI2注射液四、实验内容：(-)吸收曲线绘制吸收曲线方法一1、将被测液与空口液分别盛装于lcm比色皿小，并置丁•仪器中比色皿架上，按

3、仪器使用方法进行操作。2、从仪器上限开始毎隔20nm测暈一次吸光度在吸收峰谷的波段以5nm或更小的间隔测定…些点。3、以波长为横坐标，吸收度为纵坐标绘图，得吸收曲线。吸收曲线方法二1、将被测液与空白液分别盛装于lcm比色皿中，并置于仪器中比色皿架上，按仪器使用方法进行操作。2、按仪器使用方法操作得到吸收曲线（二）吸光系数法测含量取维生索B12注射液样品，按照其标示含量，精密吸取一定量，川蒸耀水准确稀释k倍,便稀释液每ml含量约为25ug,置lcm石英池中，以蒸憾水作空H，在紫外分光光度计（或有足够精度的其他仪器）上，找出361±lnm范围内的吸收峰,读取其吸光度,与4

4、8.31相乘，即得样品稀释液每ml含B】2的ug数。（三）标准比色法测含量（1）、标准溶液取质量较好的维生索B12注射液，按上述方法去测定其实际含量，准确稀释k倍，使其每ml含B12为50-100Ug,以此溶液作为标准溶液。（2）样品溶液参照被测样品的标示含量，精确吸取适量，用蒸憎水准确稀释m倍，使其含量与标准含量接近。（3）测定用蒸懈水为空口，用lcm玻璃吸收池在分光光度计上550nm分别测定标准溶液的吸光度（As）与样品溶液的吸光度（Ax）,计算样品含量。五、思考题：吸收系数法中为什么吸光度乘48.31即得每毫升VB】2的Pg数？实验二红外光谱和拉曼光谱综合实验(

5、1)红外吸收光谱—、目的和要求1.通过红外吸收光谱实验，了解红外光谱的基本原理，初步掌握红外定性分析法。2。了解红外分光光度计的工作原理，掌握红外吸收光谱的测量技术。二・基本原理当-•束连续变化的各种波长的红外光照射样殆时，其中一部分被吸收，吸收的这部分光能就转变为分子的振动能量和转动能量：另一部分光透过，若将其透过的光川单色器进行色散，就可以得到一带暗条的谱带。若以波长或波数为横坐标，以百分吸收率为纵坐标，把这谱带记录下来，就得到了该样品的红外吸收光谱图。根据量子力学的观点，分子的每一个运动状态都属于一定的能级，处于某特定的运动状态的分子之能址E可以近似地分三部分：

6、分子中的电子运动能E电，组成分子的振动能E振和分子的整体转动能E转,于是E=%(/”+£■振(v)+E转(丿)式中n,v,J分别为电子量子数，振动量子数和转动量子数。如果这些分子在光照射下发牛能级迁跃，就会产牛分子对光的吸收或发射。分子山低能级E'跃迁到高能级E"时，吸收光的频率（以波数表示）v=E（'=書［血_E£）+（E鉅益）+@熹•_E新）］式中c为光速，力为普朗克常数。山于（购-E缶）»（碌-硃）>〉（碣-％）电子能级跃迁引起的电子光谱，出现在紫外和可见区，称Z为紫外和可见光谱。振动能级跃迁引起的振动光谱区出现在红外光谱区，称之为红外光谱。纯转动能级的跃迁引起

7、的转动光谱，出现衣极远红外及微波区。实际上，电子能级的跃迁，常常伴随振动，转动能级的跃迁，得到所谓电子一振动一转动光谱。同样振动能级的跃迁伴随转动能级的跃迁，这时得到振动一转动光谱。我们知道，谐振子模型是双原子的极好模型，在解薛定锻方程后对得双原子分子的振动能级为E振(v)=(v+-)hcv式中1/为分子的振动频率（以波数表示）。在室温下一般分子处在势能较低的v=0振动状态，因此我们只须考虑从二0跃迁到V所吸收的红外频率v0->v,于是有Ev)-Ef(0)(V+^)chv--chvvnv===vxVchch从量子力学的观点來看，在一般地考虑红外光谱