食品微生物检测基础.ppt

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1、食品微生物检测基础姜珊珊食品微生物简介P148１微生物的概念２微生物包括的种类３病原微生物的概念４微生物的特性５细菌的基本形态和结构微生物的定义：是一群形体细小、结构简单、人肉眼看不见，必须借助于光学显微镜、电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能看到的生物。微生物包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、螺旋菌、立克次氏体、衣原体、病毒及微藻类等。病原微生物定义：大部分微生物是有益的，只有小部分微生物是有害的，可以引起各种疫病，这部分微生物叫做病原微生物．微生物的特性1个体微小，结构简单2分布广，种类多3繁

2、殖快，数量大4易于变异，适应力强5易于培养，代谢活力强细菌的基本形态和结构１细菌是一种具有细胞壁的单细胞生物.２细菌的大小以微米（μm）为测量单位（一微米等于千分之一毫米）。３根据细菌形态一般分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类。４细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、核糖体和内含物等基本结构。5细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。6细菌的繁殖方式为无性的二分裂法，一般20分钟分裂一次，即为一代。7细菌的生长曲线分为四个时期有：迟缓期、对数生长期、稳定期、衰退期。1.迟缓期：此期细菌细胞增大。2.对数

3、生长期：细菌总数与活菌数大致相等。3.稳定期：细菌繁殖速度逐渐减慢，此期细菌的增加数和死亡数几乎相等。4.衰退期：本期细菌死亡数大于增殖数，活菌减少，出现菌体变形、自溶等现象，细菌总数下降。食品微生物检测所涉及的类群见GB4789.1-2010食品安全国家标准食品微生物学检验总则菌落总数的测定首先要明白菌落的定义。菌落的定义：将细菌划线接种在固体培养基上经18∽24小时培养，长出肉眼可见的有单一细菌生长繁殖而成的细菌集团。见GB4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定

4、菌落总数的计算方法N=∑C/(n1+0.1n2)d例：0.10.012353340035n1=1n2=2N=(235+33+35)/〔1+（0.1×2）〕×10-1菌落总数的报告例:0.10.01报出值0，0/＜101，0/＜102，0/103，2/25原液0.1报出值0，0/＜11，0/＜12，0/13，2/3霉菌和酵母菌的计数见GB4789.15-2010食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数菌落计数及报告：1、选择菌落数在10~150之间的平板进行菌落计数。2、其他同菌落总数一样。注

5、意事项：1、培养温度是在25℃~28℃，培养时间是5天。2、在往平皿中加培养基时应多加一些。（当培养基自然漫过平皿底部时再多加一点）大肠菌群的测定见GB4789.3-2010食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数试样加入量（9支管，三个稀释度）液体（33.3mL）：前三支（第一稀释度）：加原液各10mL中间三只（第二稀释度）：加原液各1mL后三只（第三稀释度）：加1：10的稀释液各1mL固体（3.33g）：前三支（第一稀释度）：加1：10的稀释液各10mL中间三只（第二稀释度）：加1：10的稀释

6、液各1mL后三只（第三稀释度）：加1：100的稀释液各1mL查附录B表,报告结果例如:液体九只管均为阴性结果为＜0.03MPN/mL或＜3MPN/100mL固体九只管均为阴性结果为＜0.3MPN/g或＜30MPN/100g实验室生物安全基本知识第一节微生物实验室玻璃器皿的准备P161一、洗涤载玻片和盖玻片在清洗前可先在2%盐酸溶液中浸泡1h。二、灭菌前的准备制作棉塞包扎器皿灭菌第二节微生物培养基的制备P162培养基的定义：是根据细菌的生长需要人工配置的营养环境。按物理性状分类可分为液体、半固体、固

7、体培养基。按用途分类可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。第三节消毒与灭菌P163一、干热灭菌法1.火焰灭菌（酒精灯）2.干热灭菌（电热干燥箱）二、湿热灭菌法1.煮沸消毒2.流通蒸汽灭菌3.巴氏消毒4.加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅）消毒灭菌的基本概念1.灭菌：杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽胞的方法。2.消毒：杀死病原微生物的方法。3.防腐：防止或阻止微生物生长繁殖的方法。4.无菌：不含有活的微生物的意思。5.无菌技术（无菌操作）：防止微生物进入机体或物体的方法。第四节无菌操

8、作原则P164实验室安全及防护检验室规则1、进入检验室必须穿好工作服，戴上工作帽，必要时可戴口罩及手套。工作完毕后离开检验室，脱去工作服，要放在指定地点，工作服要经常洗涤和消毒。2、检验室要经常保持清洁、整齐，禁止饮食、吸烟及用嘴湿润铅笔或标签等物。3、在检验室进行工作时，严禁喧哗、打闹，保持肃静，不得到处走动，以免影响他人工作。4、在检验中应确保无菌操作，以达到结果正确。未经许可不准将细菌及病料携带出室外，一定要妥善保管和处理好细菌和病料。5、各项仪器