标准名称 - 北京卫生信息网.doc

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1、DB  北京市食品安全地方标准DB11/XXXXX—XXXX     食品安全地方标准配制酒中喹啉黄的测定高效液相色谱法     （征求意见稿）     XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施北京市卫生和计划生育委员会   发布DB11/XXXXX—XXXX前  言本标准为首次发布。本标准起草单位：北京市大兴区疾病预防控制中心。本标准主要起草人：房宁、李倩、赵劲松、王海云、郭晓宇、高艳青、赵颖、王子剑、朱九峰。4DB11/XXXXX—XXXX食品安全地方标准配制酒中喹啉黄的测定高效液相色谱法1　范围本标准规定了配制酒中喹啉黄含量的测定方法。本标准适用于配制酒中喹啉黄含量的

2、测定。2　原理试样经除去乙醇及CO2等前处理后，使用高效液相色谱柱分离，二极管阵列检测器（或可变波长紫外检测器）测定，外标法定量。3　试剂和材料除非另有说明，本法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1　试剂3.1.1甲醇（CH3OH）：色谱级。3.1.2乙酸铵（CH3COONH4）：优级纯。3.1.3柠檬酸（C6H8O7·H2O）：优级纯。3.1.4氨水（NH3·H2O）：优级纯。3.1.5甲酸：色谱级。3.2　试剂配制3.2.1乙酸铵水溶液(0.02mol/L)：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL溶解混匀，经0.45μm水系滤膜过滤。3.2.2柠檬酸溶

3、液：称取20g柠檬酸（C6H8O7·H2O），加水至100mL，溶解混匀。3.2.3氨水溶液：量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。3.2.4甲醇-甲酸（6+4）溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。3.2.5无水乙醇-氨水-水（7+2+1）：量取无水乙醇70mL、氨水溶液20mL、水10mL，混匀。3.2.6pH4~6的水：水加柠檬酸溶液调pH值至4~6。3.3　标准品喹啉黄标准品：纯度≥97.0%。3.4　标准溶液配制3.4.1标准储备溶液的配制：准确称取按纯度折算为100%含量的喹啉黄标准品（3.3）0.100g，用水溶解并定容至100mL，混匀，使喹啉黄浓度为1.0

4、mg/mL，置冰箱中冷藏保存。4DB11/XXXXX—XXXX3.4.2标准使用液的配制：准确移取10.00mL喹啉黄标准储备液（3.4.1）至100mL容量瓶中，用水定容混匀，得100mg/L的标准使用液。3.4.3标准曲线的配制：取6个10mL容量瓶，依次准确加入喹啉黄标准使用液（3.4.2）（0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00）mL，用乙酸铵水溶液（3.2.1）定容至刻度。该标准系列溶液中喹啉黄的浓度分别为（1.00、2.00、5.00、10.0、20.0、40.0）mg/L。1　仪器和设备4.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器或可变波长紫外检测器。

5、4.2恒温水浴。4.3固相萃取装置。4.4高速冷冻离心机。4.5电子天平：感量1mg。4.6低温高速离心机（最大转速10000r/min）。4.7聚酰胺固相萃取柱（500mg，3mL）。2　分析步骤5.1试样处理5.1.1原则：在保证测定结果准确的条件下尽量减少前处理步骤。5.1.2基体简单的配制酒（预调酒）：准确移取均匀样品5.00mL于洁净小烧杯中，于80℃恒温水浴上加热至剩余约2mL，除去乙醇及CO2，冷却后以乙酸铵水溶液（3.2.1）定容至25mL容量瓶中，混匀待测。5.1.3基体复杂的配制酒（果酒等）5.1.3.1试样制备准确移取均匀样品5.00mL于洁净小烧杯中，加入5

6、mL水混匀，于80℃恒温水浴上加热至剩余约2mL，除去乙醇及CO2，加柠檬酸溶液调pH值4~6，水浴至60℃左右，待净化。5.1.3.2净化取聚酰胺固相萃取柱（4.7）置固相萃取装置上，关闭固相萃取装置上各柱排液阀，取甲醇（3.1.1）5mL加入柱中，开启排液阀；待甲醇液面与柱中固相面等高时，再加水5mL；当柱中液面与固相面等高时，关闭排液阀，将制备好的样品（5.1.2.1）缓缓加入固相萃取柱中，静置5min，开启排液阀并调整排液流速为2滴/s；再用5mLpH4~6的60℃水分三次洗涤小烧杯，洗液转入固相萃取柱中，保持排液流速为2滴/s；待样品液全部通过小柱后，将排液阀开至最大流速

7、，依次分别用pH4~6的水（3.2.6）10mL、甲醇-甲酸溶液（3.2.4）10mL分3次洗涤，再用水洗至中性。用无水乙醇-氨水-水10mL分5次解吸，调节流速2滴/s，收集全部解吸液至25mL小烧杯中，加乙酸中和，蒸发至约2mL，以乙酸铵水溶液（3.2.1）洗涤并定容至25mL容量瓶中，混匀待测。5.2仪器参考条件5.2.1高效液相色谱条件高效液相色谱条件如下：4DB11/XXXXX—XXXX——色谱柱：迪马钻石2柱C18（250mm×4.6mm，5μm）或其它等