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《支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范草案.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、6I,EX07·诊治方案·支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）中华医学会呼吸病学分会支气管肺泡灌洗（!"#）能直接获取肺内炎症免置于含有冰块的保温瓶中，立即送往实验室检查。疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种比支气管肺泡灌洗液实验室检查较安全和有用的检查方法。对某些肺疾病，特别是一、!"#-细胞总数和分类计数检测弥漫性间质性肺疾病（如特发性肺纤维化、结节病、/0将上述回收灌洗液装入塑料离心管内，在外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病18下以/+,,(>4?%离心/,4?%，上清（原液或/,倍伴肺纤维化和#$%&’()$%*组织细胞增生症等）、肺部浓缩
2、）@7,8储存，用做可溶性成分的检测。肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等，!"#已成为+0经离心沉淀的细胞成分用9$%;A*液（不含辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。近+,B$CC、D&CC）在同样条件离心冲洗+次，每次2年间支气管肺泡灌洗液（!"#-）检测无论从检测范4?%。弃去上清后加9$%;A*液63245制成细胞悬围和检测项目上都有了长足的进展。由于!"#-检液。也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失。测受诸多因素的影响，如!"#操作时混血，大气道60在改良的E’FG$F’(计数台上计数!"#-中细分泌物混入，吸引负压大小，灌洗量，回收量，灌洗液胞总数，一般以/H/,
3、I>#表示。如果细胞数过高在肺内停留时间的长短以及肺泡上皮通透性的改变时，再用9$%;A*液稀释，调整细胞数为2H/,I>#，并等不同，所得结果亦有一定差异。因此，建立标准化同时将试管浸入碎冰块中备用。和规范化的!"#操作和!"#-实验室检测程序是获10细胞分类计数：采用细胞离心涂片装置，加入得准确结果的关键和前提。现将!"#操作及!"#-备用细胞悬液（细胞浓度为2H/,I>#）/,,!5，在18实验室检查技术做一原则规范。下以/+,,(>4?%离心/,4?%，通过离心作用将一定支气管肺泡灌洗操作方法数量的!"#-细胞直接平铺于载玻片上。取下载玻一、术前准备片立即用冷风吹
4、干，置于无水乙醇中固定6,4?%后同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤进行染色，一般用J(?&)K或9L染色。支镜气道检查后于活检刷检前做!"#。局部麻醉剂20在1,倍光学显微镜下计数+,,个细胞，进行为+.利多卡因。细胞分类计数。二、!"#操作技术二、!"#-中M淋巴细胞亚群的检测/0灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择/0采用间接免疫荧光法，将上述获得的!"#-右肺中叶（!1或!2）或左肺舌段，局限性肺病变则在细胞成分，用/,.小牛血清N5、胞悬液倒入平皿中，置于6782.BP+活检孔通过一细硅胶管注入+.利多卡因/3+45，培养箱中孵育+)，进行贴壁处理，去除肺泡巨噬细做灌洗肺段局部麻醉；（+）然后将纤支镜顶端紧密胞。楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶60取出细胞悬液，再用9$%;A*液冲洗离心/管快速注入678灭菌生理盐水。每次+232,45，总次，弃上清留+,3/,,。经贴壁处理后的细胞悬!5量/,,3+2,45，一般不超过6,,45；（6）立即用2,3液中，肺泡巨噬细胞显著减少，淋巴细胞相对增多。/,,449（&/449&:,0/66;<$）负压吸引回收灌洗10将经贴壁处理的细胞悬液分装6个
6、小锥形离液，通常回收率为1,.3=,.；（1）将回收液体立即心管内，每管+,36,!5，用微量加样器向标本中加用双层无菌纱布过滤除去粘液，并记录总量；（2）装单克隆抗体BQ6、BQ1和BQR各+,31,!5，混匀置于入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中（减少细胞粘附），18冰箱中作用/3+)。WV"@!"取出标本，先用#$%&’(液冲洗离心)次，以胞=4;0!;；涂片细胞形态完整，无变形，分布均*)+++,-./%离心)+(，然后加羊抗鼠荧光抗体各匀。)+01+!2，置于13冰箱作用4+./%。1"由于6789中可溶性成分检测受诸多检测因5"取出标本用#$%&’(液以同样速度和时
7、间离素影响，如灌注量和回收量，肺泡上皮通透性等，致心冲洗)次，弃上清留)+充分混匀细胞，取*滴使肺泡衬液稀释度亦有所不同。尽管在做6789可!2于载玻片上加盖玻片。荧光显微镜下数)++个淋巴溶性成分检测时采用内或外标记物进行标化，但检细胞并计算出标有荧光细胞的阳性率。测结果仍存在着差异，其临床价值有限，故本草案未几点说明做有关6789液性成分检测方法的规范。*"用于做支气管肺泡灌洗的纤支镜顶端直径应!"本规范不适于少量液体做支气管冲洗（68）在!"!05"+..左右，适于紧密楔入段或亚段支气和全肺灌洗技术的操作。管管口，防止大
