支气管肺泡灌洗液检查步骤及方法

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1、支气管肺泡灌洗液检查痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolarlavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和

2、肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。一、标本采集和处理通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成

3、分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。二、细胞学检查1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106

4、/L。2．淋巴细胞亚群分析：BALF中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。表13-1正常非吸烟者BALF细胞作者年例数注入量回收量（%）总细胞数（×106）细胞（×106/ml）MacLymNeutEosHunninghske198381005214．026．993700北医大三院1987101506213．414．786130．90．05

5、Ettensohn198878120637．39．495410注：Mac巨噬细胞；Lym淋巴细胞；Nuet中性粒细胞；Eos噬酸性细胞表13-2正常非吸烟者BALF中淋巴细胞表面抗原表型作者年例数淋巴细胞（%）总-?/FONT>TTHTSh：Sb细胞Yamada19862513．863．045．425．31．905．3Wallaert1987127．766．448．427．51．8?/FONT>三、可溶性物质检查BALF离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表13-3）。这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清

6、类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产生分泌成分。这些物质反映肺泡表面衬液成份，其测定对了解某些肺部疾病的病变特征，研究发病机制提供重要手段。表13-3BALF检测的可溶性物质溶质浓度近似值溶质浓度近似值总蛋白70μg/ml纤维连接蛋白30-150ng/ml白蛋白70μg/ml白细胞弹性蛋白酶+免疫球蛋白　胶原酶+IGG2.5-10μg/ml血管紧张素转换酶+IGA2.5-6μg/ml极性脂质78μg/mlIGM100ng/ml非极性脂质45μg/mlIGE0.06-0.3μg/ml前列腺素E200-2000pg/mlα1-抗胰α蛋白酶1-2μg/

7、ml血栓素B25-85pg/mlα2-巨球蛋白0.04μg/ml　　癌胚抗原0.8ng/ml　　转铁蛋白4μg/ml　　四、微生物学检查1．涂片BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染，也不含气管和左右大支气利害的分泌物，含非病原性阿菌很少，故其涂片检菌的意义较大。取BALF沉淀物进行本兰氏染色与抗酸染色检查，对结核分支杆菌的检查有较大意义。2．培养：严格无菌操作采BALF进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CGU/ml时被

8、认为有诊断意义。但标本采集方法复杂。五、寄生虫学检查1．卡氏肺孢子虫：人类一般受感染后多无明显症状。但若患者的免疫功能低下，特别是AIDS患者和大量使