仪器分析大连理工大学4.1高效液相色谱法概述.ppt

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1、第四章高效液相色谱法和超临界流体色谱法4.1.1高效液相色谱法的特性4.1.2LC与GC的对比第一节高效液相色谱的特性HighperformanceliquidchromatographyandSupercriticalfluidchromatographyFeatureandinstrumentofHPLC2021/8/124.1.1高效液相色谱法的特性特点：高压、高效、高速、高灵敏高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。LC＜＞GC互补性2021/8/12液相色谱仪2021/8/124.1.2LC

2、与GC的对比1.LC和GC的共性色谱基本理论、基本关系式及定性定量方法对于高效液相色谱同样适用。影响柱效的因素同样为涡流扩散、分子扩散及传质阻力三项。2.两者具有很大的互补性互补性：低沸点—高沸点。扩展：生化试样、手性化合物、离子化合物。2021/8/123.两者的差异液相色谱中采用液体作为流动相。液体与气体间的差异，也带来一些特殊问题。气体与液体物理性质对比分子在液体中的扩散系数要比在气体中的小4～5个数量级，产生什么结果？2021/8/124.液相色谱的特殊性(1)纵向扩散对色谱峰扩展影响很小流动相的线速率>0

3、.5cm·s-1，分子扩散项的影响可以忽略，液相色谱中H-u曲线中的最佳流速值比气相色谱小得多。2021/8/12（2）传质速率慢固定相的微孔小且深时，扩散不易进行，传质速率慢，对色谱峰的扩展影响较大。固定相颗粒越小，传质过程越快，柱效越高；减小固定相的颗粒粒度和增大孔径是提高柱效的主要手段。现代高效液相色谱的柱填料粒径都小于10μm。不同粒径ODS填料对液相色谱H-u曲线影响。2021/8/12（3）柱外效应影响显著峰展宽柱外因素：柱前峰展宽和柱后峰展宽。柱前峰展宽：由进样及进样器到色谱柱连接管引起的（柱头直接进

4、样，色谱峰的不对称性和柱效有明显改善）。柱后峰展宽：柱后连接管和检测器死体积；通用紫外检测器的池体积仅为8μL。2021/8/12请选择内容结束4.1高效液相色谱法的特性4.2液相色谱仪4.3液相色谱固定相与流动相4.4液相色谱中的主要分离类型4.5液相色谱分析条件的选择4.6高效液相色谱法的应用4.7离子色谱法4.8超临界流体色谱法2021/8/12