液相色谱基础知识ppt课件.ppt

《液相色谱基础知识ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材蒸馏离心电泳过滤超滤色谱常见的分离方式色谱法的分类HPLC分离的机理典型的仪器配置液相色谱的应用（一）“分析型液相色谱”定性及定量分析灵敏度的要求样品的复杂性样品量的要求精度及准确度的要求容易使用液相色谱的应用（二）“制备型液相色谱”分离及纯化化合物的稳定性样品的复杂性制备量的要求纯度的要求，及纯度的鉴定方法的安全性开发液相色谱方法问题∶什么样的分离结果是好的?分辨率?什么是色谱的分辨率？分辨率的公式：影响分辨率的因素：K’，a，N分辨率的方程∶k'是容量因子，表

2、达了样品与柱填料的作用强弱。a是选择性系数，描述两化合物分离的好坏程度。是化学因素。N是理论塔板数，描述色谱峰的谱带展宽程度。色谱柱的柱效N理论塔板数计算公式：Ws方法Wtan16切线法Wh5.54半峰高W3s93sW4s164sW5s255sInjectInject用“切线”法计算柱效不好的色谱柱的柱效反而比好色谱柱的要高，因为其拖尾部分测不出来GoodColumnInjectInject用“5”法计算柱效提高柱效的方法色谱柱本身减小填料的颗粒度找到最佳的流速(根据不同内径)合适的温度降低溶剂的粘度增加柱长其它

3、影响柱效的因素柱外效应连接管路进样器、检测器进样体积进样量容量因子k'改变k'值的方法∶调节流动相的极性、pH、离子强度等梯度淋洗与峰高的关系与R的关系选择性系数a定义∶a=1时两组分分不开，改变a的途径改变固定相改变流动相改变温度改变样品的本身性质a，k'，N∶如何控制分辨率?液相色谱的检测模式灵敏度、选择性、及适应能力色谱条件的优化开发液相色谱方法的考虑因素分辨率是色谱分离中主要考虑的因素在开发色谱方法时，有很多因素是很重要的。除分辨率之外，以下几个因素都要考虑。灵敏度载样量分析速度溶剂损耗成本容易使用色谱柱寿

4、命效率液相色谱基础部分试题写出色谱分辨率的定义式影响分辨率的主要因素有哪些?写出“5σ”法测柱效的计算公式影响柱效(理论塔板数)的因素有哪些?何谓“容量因子”?如何改变之?容量因子越大越好吗?不同品牌的色谱柱的选择性不同,对吗?