任务2培养基的制备技术.ppt

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1、任务2培养基的制备技术学以致用——养细菌———人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的混合营养基质。一、认识化能自养菌氧化硫杆菌的培养基粉末状硫10gKH2PO44gMgSO40.5gCaCl20.5g(NH4)2SO40.4gFeSO40.01g水1000mL（自来水即可）提问：其中各组分作用是什么？空气中的CO2能源碳源是什么？氮源盐也可补加一部分碳酸钠。培养一种大肠杆菌的培养基配方如下：葡萄糖0.5gK2HPO41gMgSO40.2gNaCl5gNH4H2PO40.4g水1000mL大肠杆菌的营养类型？化能异养型。培养基的基本要求？至少有

2、一种有机物，实验室中通常是葡萄糖培养基类型合成培养基半合成培养天然培养基基本培养基富集培养基鉴别培养基固体培养基液体培养基半固体培养基按成分不同划分按用途划分按物理形态划分二、培养基的分类(一)按成分划分：天然培养基合成培养基半合成培养基(一)按照培养基成分来源分：a.天然培养基：利用化学成分还不清楚或不稳定的天然有机物制成的培养基。优点：原料来源充足、营养丰富、经济简便缺点：成分和含量不确定，重复性差用途：适用于实验室粗放性实验和大规模生产之用。举例：麦芽汁培养基天然培养基b.合成培养基：用化学成分和量都确切知道的纯化学试剂制成的培养基。优点：成分精

3、确、稳定、重复性好缺点：价格较贵，微生物生长缓慢用途：适用于做分类鉴定，生物测定、选种育种等要求较高的研究工作。举例：高氏一号培养基，查氏培养基等(一)按照培养基成分来源分：c.半合成培养基：用天然有机物和化学药品制成的培养基。特点：能充分满足微生物的营养要求，适合于大多数微生物的培养。举例：牛肉膏蛋白胨培养基可溶性淀粉20.0克KNO31.0克K2HPO40.5克MgSO4·7H2O0.5克NaCl0.5克FeSO4·7H2O溶液2滴（10%）蒸馏水1000毫升牛肉膏3.0克蛋白胨10.0克食盐5.0克蒸馏水（自来水）1000毫升合成培养基天然培养基

4、◆天然的固体培养基——如马铃薯块、麸皮、米糠、胡萝卜条、木屑等；◆凝固剂(1.5～2％琼脂)，可用于微生物的分离、鉴定、计数、保藏等凝固剂(0.3～0.6％琼脂)。常用于观察细菌运动特征，噬菌体效价鉴定等。微生物能充分接触养料，有利于生长繁殖及代谢产物积累，常用于微生物大规模工业发酵生产。固体培养基(solidmedium)半固体培养基(semi-solidmedium)液体培养基(liquidmedium)（二）按照培养基的物理性状分①不被微生物液化、分解和利用；②在微生物生长的温度范围内保持固体状态；③凝固点温度对微生物生长无害；④不因灭菌而被破坏

5、；⑤透明度好、黏着力强；⑥配制方便，价格低廉。理想的凝固剂应具备以下条件：琼脂：胶体多糖，熔点96℃，凝固点40-50℃基础培养基加富培养基选择培养基鉴别培养基生产用培养基(三)按照培养用途分：b.加富培养基：根据待分离微生物的特殊营养要求配制的营养物质。使目标微生物能在其中旺盛生长，逐步占优势，从而达到与杂菌分离的目的。培养时要同时考虑营养成分和培养环境两个因素，才能达到预期的目的a.基本培养基：能满足一般微生物生长繁殖所需要培养基。(三)按照培养用途：根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类；分离培养在特殊环境中才能生长的微生物，以纤

6、维素或石蜡油为唯一碳源的富集培养基，可以从混杂的微生物群体中分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物。富集培养C.选择培养基在培养基中加入抑制剂以杀死或抑制不需要的菌种，而目标微生物因对该抑制剂有抗性而正常生长繁殖的一类培养基。(三)按照培养基的用途分：抑制剂：青霉素（抑制G+细菌）分离G-细菌抗生素氯霉素，链霉素（抑制细菌分离酵母、霉菌染料胆盐：抑制G+分离G-孟加拉红：抑制分离用于选择性的物理因素有：温度，氧气，pH值，渗透压等目的：增殖少数手段：“投其所好”混合样品富集培养基成为中劣势菌选择培养基优势菌目的：抑制多数菌手段：“取其所抗”d.鉴别培养基：

7、利用微生物的代谢产物与指示剂的显色反应，快速鉴别不同微生物的营养基质。(三)按照培养基的用途：鉴别培养基(differentialmedium)伊红-美蓝培养基（EMB）：伊红和美蓝二种染料，可用于鉴别食品、水源、乳制品等待检样品中是否含有大肠杆菌。如果有大肠杆菌，则其代谢产物能与伊红与美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。◆目的：为了获得数量充足和质量较好的健壮菌体，同时兼顾菌种对发酵培养基的适应能力。◆特点：营养成分丰富且完全，氮源和维生素含量高、易被利用◆目的：获得最大强度的代谢产物。◆特点：原料粗放、来源充足、价格低廉、碳源比例大，有时还在

8、发酵培养基中添加前体、促进剂或抑制剂。（1）种子培养基（2）发酵培养基(四)按照培养基的使用目