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时间:2020-09-25
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1、实验二、培养基的制备一、实验原理:培养基是供微生物生长、繁殖和代谢的营养物质适宜的pH值、一定的缓冲能力及合适的渗透压半固体培养基:液体培养基中加入0.5-1%琼脂固体培养基:液体培养基中加入1-2%琼脂琼脂是从石花菜等海藻中提取的多糖,是应用最广泛的凝固剂,它在96-100℃融化,46℃以下凝固培养基经灭菌后方可使用根据培养基的用途:可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基,如结晶紫能抑制革兰氏阳性细菌的生长等增殖培养基:在普通培养基
2、中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基鉴别培养基:在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。如常用的麦康凯培养基,它含有胆盐、乳糖和中性红。胆盐具有抑制肠道菌以外的细菌的作用(选择性),乳糖和中性红(指示剂)能帮助区别乳糖发酵肠道菌(如大肠杆菌)和不能发酵乳糖的肠道致病菌(如沙门氏菌和志贺氏菌)固体培养基:分离、纯化、生物活性检测半固体培养基:可作穿刺试验,观察细菌的运动
3、及短期的保存菌种液体培养基:确定细菌的生长曲线、保存菌种二、目的要求1、掌握基础培养基制备的原理和要求2、掌握一般培养基的制备过程及pH的测定三、培养基制作的注意事项容器不含抑菌物合适的pH值(7.2-7.6)药匙不要混用,如需要反复使用时应擦拭后再使用制好后需高压灭菌,如因特殊情况不能及时灭菌应放冰箱内暂存不同培养基各有配制特点:如加入抗生素、血清等应注意温度不能太高无菌检查:随机挑选制备好的培养基一两份置37℃恒温箱内24h四、培养基制备的一般过程称取→溶解→调pH→定容至1000ml→过滤→分装→灭菌
4、→菌检称取:牛肉膏可以在烧杯上称量,随后放入热水中;蛋白胨极易吸潮,称量时要迅速溶解:向烧杯中加入少许所需水量,隔以石棉网小心加热,用玻璃棒搅拌调pH:待培养基冷至室温时检测其pH值基础培养基制备1、配方:牛肉膏5克蛋白胨10克NaCl5克磷酸氢二钾1克用蒸馏水定容到1000ml2、按量称取→溶解→调pH→过滤→分装10根试管→灭菌→菌检琼脂培养基的制备测好PH后,称量7.5g琼脂粉,用肉汤定容至500ml,加热,待琼脂完全溶解后分装10根试管作业1、培养基按用途及状态分成几类?各有什么用途?2、制作培养基
5、时应注意哪几点?
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