抗心磷脂抗体(ACA)IgGELISA.pdf

《抗心磷脂抗体(ACA)IgGELISA.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、抗心磷脂抗体(ACA)IgGELISA用途磷酯有着广泛的生理意义。循环抗磷脂抗体的存在可引起种种疾病，这些抗磷脂抗体的作用途径至今不清楚。可能通过与内皮细胞膜上磷脂的交叉反应防止花生四烯酸释放，致使前列环素合成减少，从而促进血小板凝聚；另一种机理是防止血纤维蛋白溶解酶原激活剂的释放，降低血纤维蛋白溶酶原转变成血纤维蛋白溶酶，致使血纤维蛋白裂解减低。ACA的存在常易发生静脉及动脉血栓形成。ACA对血小板膜上的磷脂具有交叉反应，导致网状内皮系统摄血小板作用加强。ACA阳性见于急性缺血性脑病，缺血性视神

2、经病、脑血栓形成、偏头痛样头痛、肺源性高血压和习惯性流产。抗磷脂抗体综合症的实验室诊断主要是抗磷脂抗体测定。本试剂盒用于定性检测人血清中的抗心磷脂抗体ACAIgG浓度。试剂盒组成(储存于2-8°C)酶标板96wells浓缩洗涤液(20X)25ml吸收液12ml酶联物12ml底物A6ml阴性对照1vial底物B6ml终止液6ml标本收集1.避免溶血、高血脂标本。2.标本中若有悬浮物，应离心去除。3.标本若不及时检测，请冻存于-20°C。准备工作1.取出所需板条，其余立即密封放回2-8°C。取出的板条

3、应放入自封袋内（密封）平衡至室温再试验，以防水滴凝聚在冷板条上。2.浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至500ml)。未用完的放回2-8°C。3.试剂盒应平衡至室温再试验。试验过程1.样品孔内先加入100ul吸收液，再加入10ul血清标本。2.加入100ul阴性对照至相应孔内。(必要时加入100ul阳性血清至适当孔内)3.空白孔内加入100ul吸收液。4.轻轻混匀30秒钟，封住板孔，37°C45分钟。5.洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，

4、洗5次。6.每孔加入100ul酶联物,轻轻混匀30秒钟，封住板孔，37°C30分钟。7.洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。8.每孔加入底物A、B各50ul；37°C避光10±3分钟。9.每孔加入终止液50ul，混匀，即刻在450nm处读取OD值。结果判断1.样品的OD值应减去空白孔的OD值。(对照的OD不用减去空白孔的OD值)2.吸收液内含干扰物质消除剂。3.阴性对照的OD值应小于0.20。4.Correction值标于阴性对照上,Cu

5、toff=Correction+阴性对照OD值5.Index值=样品OD值/Cutoff值6.Index≥1为阳性；Index在0.91-0.99间为可疑；Index≤0.90为阴性。注：ò阳性血清已经处理，不具有传染性，但运输途中可能发生失活等现象。ò阳性血清已经冻融，不宜再冷冻，收到后请立刻冷藏。ò阳性血清已经稀释并添加防腐剂，能够保存一段时间，但冷藏期间逐渐失活属正常情况。