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时间:2020-01-12
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1、细菌大小的测定第一部分细菌的染色技术目的要求染色剂和染色的原理实验材料实验程序实验材料显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯。石炭酸复红染液(草酸铵结晶紫染液或蕃红染液)菌种:金黄葡萄球菌或大肠杆菌实验程序(细菌染色的方法和步骤)细菌染色的方法:简单染色法:用一种染色液染菌体后,就可以观察微生物的大小、形状和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。染色技术的一般过程涂片 干燥 固定 染色 水洗 干燥 镜检第二部分细菌大小的测定目的要求学习使用目测微尺和物测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。测定微生物细胞大小是在显微镜下利用测微尺进行。测
2、微尺可分为目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是特制的圆形玻片,中央有一刻度尺(50等分),可放入目镜镜筒内,用于测定细胞大小。镜台测微尺为一载玻片,上贴有圆形盖片,中央有总长度为1mm(100等分),每小格长0.01mm(10um)。目镜测微尺每小格大小随显微镜放大倍数不同而改变,使用目镜测微尺进行测量之前必须用镜台测微尺标定,以求出在某一放大倍数下目镜测微尺每小格所代表的长度,然后用标定好的目镜测微尺进行测量。实验原理(1)目测微尺的标定:1将目测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下;把物测微尺放在载物台上,刻度朝上。2用低倍镜找到物测微尺的刻度,移动物测微尺和目测微尺使两者的第一条刻度
3、线重合,3顺着刻度找出第二条完全重合的刻度线。4计算两刻度间目测微尺的格数和物测微尺的格数。由物测微尺的刻度每格长10µm,得(2)用目镜测微尺测定枯草杆菌大小取下物测微尺,将细菌染色标本置于载物台上,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。测定10个菌体求出平均值例如:目镜测微尺在油镜下,每格相当于1.5um,若细菌菌体平均长度相当于目镜测微尺的2格,则菌体长度为3um注意:校正目测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度等)进行,而且只能在这特定的情况下才可重复使用。实验报告(1)目镜测微尺标定结果记录物镜物镜放大倍数目镜测微尺格数镜台测微尺格数目镜测微尺每格
4、代表长度(um)低倍镜10油镜100(2)在油镜下测量细菌大小结果记录菌体编号大肠杆菌测定结果金黄色葡萄球菌直径大小结果宽长目尺格数菌体直径平均值目尺格数菌体宽(um)平均值目尺格数菌体长(um)平均值1234510….实验结束
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