apmv-4即禽副粘病毒4型.ppt

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1、Evaluationofthegeneticdiversityofavianparamyxovirustype4禽副粘病毒4型基因多样性的评估Introduction副粘病毒科病毒已经在世界各地的禽类、水生和陆生动物中分离出来，而大部分副粘病毒是从禽类中分离出来的副粘病毒亚科禽腮腺炎属病毒，因此称之为禽副粘病毒（APMVs）。APMVs分为9个血清型，APMV-1到APMV-9，最近APMV-10和APMV-11这两种血清型分别被发现。IntroductionAPMV-1包含所有NDV的株型，它可以感染240种鸟类，宿主范围非常广泛。APMV-2，-3和-7可以感染鸡和火鸡等笼养鸟和驯养家禽

2、。APMV-4，-6，-8和-9只能感染鸭和鹅等水禽APMV-5大多从鹦鹉分离出来，也可以从野鸟中分离出IntroductionAPMV疾病发生有相当的差异。APMV-1（NDV）的临床表现可以从亚临床表现到严重的表现，从而造成鸡的高死亡率APMV-2可以造成轻微的呼吸疾病和降低产蛋率，还可以使火鸡不育APMV-3与脑炎有关并造成笼养鸡的高死亡率，还可造成火鸡的呼吸疾病和小鸡发育不良IntroductionAPMV-4可以造成鸡的肺炎和卡他性气管炎APMV-5能使未发育完全的鹦鹉抑郁、呼吸困难、腹泻、斜颈和严重致命的肠炎，造成高死亡率APMV-6使火鸡出现呼吸疾病并降低产蛋率，但对于鸡无致病

3、性APMV-7使火鸡出现呼吸疾病和气囊炎，并降低其产蛋率APMV-8和-9不造成任何疾病IntroductionAPMV是一种单股、负链、不分段的RNA病毒，序列长度范围从14904nt到17262nt，可转录6个mRNA，进而编码6种蛋白，分别为核衣壳蛋白(nueleocapsidprotein，N)、磷酸化蛋白(phosphoprotein，P)、基质蛋白(martixprotein，M)、融合蛋白(fusionprotein，F)、血凝素一神经氨酸酶蛋白(haemagglutinin—neuraminidase，HN)和大聚合酶蛋白(largeprotein，L）APMV-6还有一个额

4、外的第七个mMRNA，编码一个小的疏水蛋白（SH）P基因还含有2个编码非结构蛋白的基因，分别是W蛋白和V蛋白IntroductionAPMV基因顺序为3’-N-P-M-F-(SH)-HN-L病毒转录开始于3’端单独的启动子，其复制是由起始子（GS）和终止子（GE）介导的开始-终止-再开始的循环过程APMVs基因核苷酸长度是6的偶数倍，是为了有效地RNA复制和多核苷酸在核衣壳的包装IntroductionAPMV-1的全基因序列及其抗原和序列的多样性已经被收录根据F基因的序列，NDV被分为两大类（Ⅰ和Ⅱ）。Ⅱ类进一步分为15个基因型，包括已经确定的基因型（Ⅰ到Ⅸ和Ⅺ），还有5种新的基因型（Ⅹ,

5、Ⅻ,XIII,XIV和XV）而我们所知的APMV-2到-9的抗原和基因多样性是非常有限的。APMV-2全基因序列和局部HN序列的分析显示其有一些亚群，APMV-3全基因序列和局部M序列的分析显示其有一些亚群存在，APMV-6序列比较显示其存在亚群，APMV-9局部F和HN基因序列进化分析显示其存在亚群Introduction野生水禽是NDV和禽流感的容器，同时通过不表现临床症状来保存病毒。这可以促进对家禽以及水生和陆生野禽监测项目的发展APMV-4经常从各地监测项目中的健康水禽中分离出来但是其基因分析从没被报道过APMV-4原型（鸭/香港/D3/75）基因全长测序，还有韩国野鸭和比利时野鸭的

6、APMV-4基因全长测序，最近还对埃及鹅的APMV-4基因全长测序比较香港和韩国的基因全长显示其基因多样性是稳定的，推测其有抗原亚群Introduction为了进一步了解APMV-4的基因多样性，对P,M,F和HN基因测序，用5组意大利鸭分离出的APMV-4进行试验，并与公布的香港、韩国和比利时的APMV-4序列进行比较同时研究抗原多样性所到达的程度Materialsandmethods病毒和细胞APMV-4分别为意大利鸭3670/06（IT-3670）意大利野鸭3936-70/06（IT-3936）意大利短颈野鸭4103-27/06（IT-4103）意大利野鸭4284-20/06（IT-4

7、284）意大利野鸭4523-4/（IT-4523）香港鸭D3/75（HK）（国际兽医实验局）用9日龄SPF鸡胚培养，免疫4天后收集感染的尿囊液，并测定各自的效价美国标准菌库提供鸡胚成纤维细胞细胞系，在含10%牛胎血清的细胞培养基中培养。用效价为28血凝单位的100倍稀释病毒液感染该细胞（含或不含1ug/ml胰蛋白酶的无血清细胞培养基），连续7天观察细胞病变效应以及细胞培养液上清的血凝活性Materialsan